血吸虫病诊断技巧研究进展.doc

血吸虫病诊断技术研究进展 摘要： 血吸虫病是诊断在其防治过程中举重若轻，总结了病原诊断技术、免疫诊断技术及其他诊断技术的研究进展，并提出展望。 关键词 ： 血吸虫病；诊断技术 血吸虫病是我国危害最严重的人畜共患寄生虫病之一。全世界有76 个国家和地区流行血吸虫病, 被感染人口达2 亿, 受威胁人群约5～ 6 亿, 严重影响人群健康和社会经济发展[1]。血吸虫病诊断在其防治活动中始终举重若轻，为防治活动的计划、实施和防治效果评价等各环节提供必要的信息和科学依据。寻找快速准确敏捷，且具有评价疗效和防治效果以及疫情的诊断方法是目前亟待解决的问题。本文主要综述前人对血吸虫的诊断技术，主要从病原诊断的进展、免疫诊断的进展及其他诊断方法来扼要介绍血吸虫病诊断技术研究进展，并提出展望。 病原诊断的进展 粪便中检测血吸虫卵 1.11 加藤法[2] 取粪便置于载玻片上，用浸透甘油透明液的玻璃纸覆盖，轻压。镜检时需特别注意与未受精蛔虫卵的鉴别。此法与常规直接涂片法相比可提高虫卵的检出率。 1.12 改良加藤法[3、4] 将筛网覆盖在粪标本上，刮取从筛孔挤溢出的粪便；将定量板紧贴于载玻片上，把刮棒上取得的粪便填满模孔，刮去多余部分，掀起定量板，在粪样上覆盖含孔雀绿甘油的玻璃纸条，展平后用压板加压，粪样即在玻璃纸和玻片之间铺成椭圆形；在30℃~37℃温箱中透明0.5~1h后镜检并作虫卵计数；每克粪便虫卵数（EPG）为每板虫卵总数乘以24，再乘以粪便性状系数。此法操作简便，操作的过程中虫卵不会散失，效果好。 1.13 过滤集卵镜检法 （1）定量集卵直检法［5］：取粪便置于网兜内搅拌荡洗后，移去网兜，将粪液倒入接有滤菌器的塑料针筒内滤过，然后取出尼龙网片置载玻片上直接镜检观察虫卵特征并统计虫卵数。定量集卵直检技术的敏感性高，虫卵检出率明显高于加藤法，与集孵法相当；并且该法检出的虫卵形态不变，结构清晰，很容易辨认，诊断准确。（2）改良滤纸集卵法［6,］：用福尔马林和水将粪便稀释，然后取此稀释液在滤纸上过滤，冲去粪渣，将滤纸置于培养皿中，用水将滤纸打湿后镜检虫卵。检出的毛蚴呈紫色，卵壳不着色。该法可以保存滤纸留作记录，并可避免虫卵的散失，但其检出率较低。 1.14 孵化法 孵化法就是将除去粪渣后的粪便沉淀进行孵化，使毛蚴在短时间内孵出，以达到检测血吸虫目的的一种方法。具体又分为：尼龙袋法［7］、顶管法［8］、集孵法与促孵法［9］等。该法检出率高于常规方法，但用时太长，工作量大。 组织内冲虫卵检测法 1.21 直肠粘膜活体组织检查!与直肠粘膜活检法相比，该法阳性检出率虽略低，但检出活卵或近期变性卵的机会要高得多。（3）直肠显微镜检：用直肠显微镜的前后触夹住肠粘膜，在原位对肠粘膜进行检查。此法的优点为不损伤组织，安全方便。慢性及晚期血吸虫病人肠壁组织增厚，虫卵排出受阻，故粪便中不易查获虫卵，可应用直肠镜检查。穿刺取得的标本长1～2cm﹐直径约1mm﹐先放在吸水纸片上﹐然后放入10％的甲醛中固定。操作方法比便、快速、通常用于现场筛选可疑病例与粪检虫卵阳性的符合率为90%左右，但可出现假阳性或假阴性反应，与其他吸虫病可产生较高的交叉反应；并且病人治愈后多年仍可为阳性反应。!当抗原与抗体孔间呈现明显的棕红色沉淀线为阳性反应.ELCIEP除对血吸虫病具有辅助诊断价值外，还具有与环卵沉淀反应相似的疗效考核价值. 胶乳凝集试验（LA）［26］ 以聚苯乙烯胶乳颗粒为载体，将抗原通过物理吸附或化学结合方法连结在颗粒表面，作为抗原试剂!将此胶乳试剂1滴加入待测血清中，如有抗体存在则出现清晰凝集颗粒即为阳性反应!早期采用物理吸附法，制成的抗原批间差异大，反应重复性不佳，未能广泛应用.最近改用化学交联方法制成虫卵抗原胶乳试剂，克服了上述缺点，测试结果证明有较好的敏感性和特异性. 金标免疫渗滤法　金标免疫渗滤法是近几年来从固相免疫测定法发展起来的新技术,它的特点是以微孔膜作为载体,用胶体金代替酶标记物,省略底物反应步骤,阳性反应呈红色斑点,肉眼清晰可见,操作简便快速,整个实验过程在数分钟内完成,且试剂稳定、易长期保存。 胶体染料试纸条法（DDIA） [27] 将待测血清和标记染料加入PVC小杯中，用试纸将其吸干后，观察结果。当检测带与对照带均出现紫蓝色条带则为阳性[28]。DDIA是近年研制的用染料标记的日本血吸虫可溶性虫卵抗原检测日本血吸虫病人血清抗体的方法，其操作简单、快速，价格低廉，不需要专门设备，并且具有较高的敏感性和特异性，因此，该法适合进行大规模的血吸虫病人群普查的筛选.[29] 循环抗原的检测 目前认为，循环抗原的存在是现症感染的依据，治疗后，宿主体内的循环抗原迅速消失。在感染的宿主体内，可检测出的循环抗原有肠相关抗原（GAA）包括