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病毒与其它微生物的区别 病毒致病过程 病毒核酸可以整合到宿主细胞基因组中 DNA是噬菌体的遗传物质 某些病毒感染引起细胞融合 某些病毒引起细胞生长习性和形态特征的转化 转录增强子元件、转录因子与启动子结合 ---SV40的研究 RNA聚合酶Ⅲ与启动子识别并进行转录 --腺病毒VA基因的研究 基因在DNA基因组上的位置是不连续的,有内含子存在,转录体需要剪裁,拼接成mRNA ---T4噬菌体和腺病毒的研究 mRNA3’-端的聚腺苷酸化-----痘病毒 首次发现聚腺苷酸化信号-----SV40 mRNA5’-端的帽子结构和碱基的甲基化作用-----呼肠病毒 翻译后的前体经蛋白酶加工裂解成为功能蛋白质,经高尔基体的糖基化以及被蛋白激酶磷酸化的研究------病毒 意义: 1. 揭示了病毒正链RNA基因组复制和基因表达的一种新类型。 2. 对20世纪60年代所形成的中心法则理论的重要修饰和补充。 3. 反转录酶广泛应用于cDNA克隆的技术。 20世纪70年代另一个病毒学研究中最有深远影响的发现。 在对噬菌体与其寄主相互关系的研究中发现的。 1972年 P. Berg在斯坦福大学第一次体外构建重组DNA分子,即将λ噬菌体基因和E.Coli半乳糖基因插入SV40的环状DNA中。 1973年 H.Boyer和S. Cohen用E.coli质粒pSCIOI(Tetr)上仅有一个EcoRⅠ切点的特点与另一个质粒R6-3(Neor)组合成嵌合质粒,转化E.coli后在含四环素和新霉素培养基上选出有Tetr和Neor的新转化子。 病毒的定义 体积小,结构简单,只有一种类型的核酸,只能在活的、敏感细胞内以复制方式增殖的非细胞型微生物。 病毒大小 病毒大小 衣 壳 粒(capsomere): 衣壳粒的特点: 衣 壳(capsid): 核 衣 壳(nucleocapsid): 包 膜(envelope) 包膜的特点: 包膜蛋白的种类: B.基质蛋白:(有些病毒无) 包膜的形成: 刺 突 的 功 能: 单链DNAsingle strand DNA,ssDNA 单链RNAsingle strand RNA, ssRNA 核酸功能: 蛋白质(Protein) 其他成分 理化因子对病毒的影响 温度对病毒的影响 pH值对病毒的影响 病毒的分类 根据毒粒形态、物理化学特性、抗原特性、生物学特性进行分类。 到目前为止,完整的病毒分类学有3个目,69个病毒科,9个病毒亚科,243个病毒属,1550种和2404个暂定种。一些属性不很明确的属称暂定病毒属。 现在,用于特定展示次序的标准是病毒基因组的本质,已知的病毒根据核酸类型分为九组展示次序:双链DNA病毒,单链DNA病毒,DNA与RNA逆转录病毒,双链RNA病毒,单链RNA病毒,亚病毒病原体(类病毒,卫星病毒和朊病毒)。 建立高活性的原生质体的分离和培养方法 噬菌体复制周期 动物病毒的复制周期: 吸附(adsorption) 侵入(penetration) 脱壳(uncoating) 生物合成(biosynthesis) 装配和释放 吸附(adsorption): 病毒粒子与敏感细胞表面特异性受体的接触、结合,分两步。 病毒吸附蛋白 病毒表面蛋白质(壳体蛋白或包膜糖蛋白)的性质决定了病毒与敏感的细胞表面受体的特异性结合。这些能够识别细胞受体的病毒体表面结构蛋白分子能吸附于细胞受体,这样的病毒表面结构蛋白称为病毒吸附蛋白(virus attachment protein,VAP) 受体 存在于细胞表面的病毒细胞受体是能被病毒吸附蛋白识别,使病毒特异性地进入细胞,启动感染发生的特殊细胞位点。病毒的细胞受体在很大程度上决定了病毒的宿主范围、组织亲和性,并影响病毒的致病性。 影响受体选择的因素 病毒吸附位点与宿主细胞膜密切接触 存在受体--相关信号传导途径 受体干扰 病毒吸附的环境因素 温度:一般认为,在一定范围内,病毒的吸附速率与温度成正比。 离子环境:在一定浓度的阳离子存在的条件下,能够促进病毒对细胞的吸附。 pH:由于病毒与细胞的吸附反应的第一步是以静电引力结合,环境pH对其结合是有影响的,不同的病毒--细胞系统吸附反应的最适pH有很大的不同。 侵入(penetration) 脱壳 (uncoating) 直接注入 依靠细胞酶 利用病毒自身翻译的酶 生物合成 (biosynthesis) 基因组的复制 非结构蛋白的合成 结构蛋白的合成 病毒生物合成分期进行 病毒基因组早期基因的表达
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