5、卡式法血型鉴定、交叉配血的注意事项-深圳市罗湖区人民医院.ppt

卡式法血型鉴定、交叉配血是近几年来逐渐兴起的一项利用免疫检测的新方法，也就是利用生物化学凝胶过滤技术和离心技术及免疫学抗原抗体特异性反应相结合的产物。 交叉配血主要是检测红细胞与血清、血浆的相容性。 一、卡式法的原理 此法是通过调节凝胶的浓度来控制凝胶间隙的大小，使其间隙只能允许游离的红细胞通过，从而使游离的红细胞和聚集的红细胞分离。当抗原、抗体反应，抗人球试验时，血细胞发生凝集，离心时，凝集块不能通过凝胶间隙，而留在凝胶孔的上层，呈阳性反应。未凝集的血细胞离心时可通过凝胶间隙，而沉积在凝胶孔的底部，则呈阴性反应。 二、卡式法的操作步聚 ●卡式法交叉配血试验步聚： 1、制备同型受、供血者血清和0.8-1%的红细胞悬液。 2、标记达Diana卡(主侧、次侧、抗体1、2、3)。 3、主侧管中加入50 μl供血者0.8-1%红细胞悬液和25μl受血者血清。 4、次侧管中加入50 μl受血者0.8-1%红细胞悬液和25μl供血者血清。 5、然后在37℃恒温箱中孵育15 min，再离心10 min，取出判断结果。 ●卡式法的结果判读标准 ●卡式法的常见配血结果 ①主次侧均相合。 ②主侧凝集 ，次侧相合。 此时因患者血清中存在有不完全抗体，需进一步鉴定抗体类型，再选择出和患者相合的同型血进行输注方为安全。（常见于血液透析科反复输血的患者） ●卡式法的常见配血结果 ③主侧相合，次侧凝集 。 此时应用受血者红细胞悬液做直接抗人球蛋白试验，一般为阳性，这种情况输注同型的洗涤红细胞比较安全。（常见于肿瘤、血液透析、营养不良及贫血等患者） 可能的原因为：药物（如青霉素、头孢菌素类奎尼丁及非那西丁等）、疾病、反复输血等。 三、卡式法的优点 此方法操作简单、结果清楚、明确、稳定，易判定，重复性好，易保存。一卡六孔有利于主、次侧的对比，灵敏度高。孔内加有抗血清、抗人球，可直接检出不完全抗体和血型，标本用血量少 。 四、操作时应该注意事项 1、每日实验前，先取出稀释液、标准细胞、卡式凝胶板，放置室温一段时间，以防冷凝集等。工作完将剩余的标准细胞、卡式凝胶板放回冰箱内保存，以防孔内凝胶干涸。 2、严格按操作程序操作，将所用的卡板先做上标记，并注意保质期。 四、操作时应该注意事项 3、检查板卡的封口有无损坏，板孔内的凝 胶有无干涸或气泡，有则不能使用。 4、血型鉴定时用正、反定型的细胞浓度在5%左右，交叉配血细胞浓度在0.8%-1%左右，不可太浓、也不可太稀。 配血细胞太浓度造成的影响 用凝聚胺法重配结果主、次侧相合 配血细胞太浓度造成的影响 用凝聚胺法重配结果主、次侧相合 四、操作时应该注意事项 5、加入板孔的量一定要一致，牢记先加细胞悬液，再加血浆(血清)。 6、在加样时，反定型孔先加样，以使标准细胞与血浆(血清)反应。应先加细胞悬液，再加血浆(血清)。 7、纤维蛋白可吸附部分红细胞，应将血样离心后再做。 四、操作时应该注意事项 8、血型检测时应正、反定型对照，确定结果及A亚型。正定型结果者为弱阳性，就怀疑为A、B、O亚型，可重做完全测试。正、反结果不符时，请设计实验进行分析。 9、某些药物、疾病可导致弱阳性及正、反定型不符。细菌严重感染及异常血清蛋白可影响结果。 四、操作时应该注意事项 10、标本的防凝剂尽量不要用肝素防凝。由于肝素带有高价负离子，对特殊患者可用硫酸鱼精蛋白防凝。 11、每进一批卡板，都应先做质量监测，如果质量监测呈阳性反应，可将标准细胞用盐水洗涤再做。 12、用完的卡板应先用1%的84消毒液浸泡后再进行焚烧处理。 谢谢！