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Cedex XS 细胞计数仪操作手册
Cedex XS 细胞计数仪操作手册
一、 启动Cedex XS 系统
1. 打开计数仪:按下计数仪上的ON/OFF按钮,按钮亮起蓝色光表示仪器已打开;
2. 打开Cedex XS 控制软件:
打开配套电脑,进入Windows操作系统;
双击桌面上的Cedex XS 图标,进入Cedex XS 控制中心;
3. 调节白平衡:首次安装Cedex XS系统或移动系统后必须调节白平衡。
把支架拉出;
点击Cedex XS 控制中心中的HWM键,打开硬件管理对话框;
点击WHITE BALANCE键进行调节,结果将自动保存;
调节完毕后关闭对话框。
二、 细胞计数与活性测定
1. 样品制备
① 用培养基或PBS将样品稀释至细胞数不高于5×106/ml;
② 使用0.2%台盼蓝染色(一般为10μl、1:1):台盼蓝对血清蛋白亲和力更强,若大量血清蛋白导致图像背景过暗,可以将样品离心,用无蛋白培养基或生理盐水悬浮细胞进行计数;
③ 将细胞悬液充分混匀;
④ 用移液枪取细胞悬液加入样品,每10μl;可以一次测定八,也可测定单。
2. 进样:样品有八个,一次可测定四个。
① 拉出支架;
② 加有样品方向朝里,将样品放上支架;
③ 将支架推入计数仪,有少许卡扣感表示已就位:样品位置指示灯表示样品测定进程。
三、 软件设置:
1. 打开测定界面:在Cedex XS 控制中心点击MEASURE键,进入测定界面;
2. 设置样品参数:
① 在样品参数栏输入样品名(Reactor ID),可在下拉栏选择或手动输入,最多可输入21个字符;
② 输入样品编号(Sample ID),最多21个字符;若样品名已存在,软件将自动延续样品编号,也可手动重新输入编号;
③ 软件将自动记录日期和时间,表明样品测定的实际时间;
④ 点击MI×键,出现进样体积对话框;
⑤ 输入样品量(Sample Volume)、台盼蓝用量(Dye Volume)、稀释剂用量(Diluent Volume);
⑥ 系统将自动计算稀释比例等,可以手动输入注释(Comments)。
3. 设置测定与分析参数:
① 在分析参数栏选择需要的精度水平(Precision):精度水平表示单次测定样品数,最多8个;
② 选择细胞类型,默认的细胞类型有:标准大小细胞直径约12-14μm;可识别对象;小直径约8μm;
③ 系统自动添加系统名和测定时间。
四、 开始测定
① 点击START MEASUREMENT键;
② 测定多个样品时,在弹出对话框后将支架推进一格,点击确定自动开始测定程序;
③ 重复上一步骤测定其他样品;
④ 若测定样品多于四个,可将抽出后调转方向重新插入进行上述测定程序;
⑤ 全部测定结束后关闭对话框。
五、 计数结果
1. 在测定界面获得结果
测定程序完成后,结果在测定界面的数据栏(Result Data)显示,数据栏有两个表格:第一个表格显示总细胞数,第二个表格显示单次测定中每个样品室的测定结果。
两个表中分别列出以下参数:
Viable Cell Conc.: 活细胞浓度 [×105/mL]
Total Cell Conc.: 总细胞浓度 [×105/mL]
Viability (%): 细胞总数中活细胞的
Total Cell Count: 测定总细胞数
Avg Compactness: 活细胞与理想状态细胞形状的平均变异程度(1表示细胞形状均一)
Avg Diameter: 测定活细胞平均直径 [μm]
Aggregate Rate (%):成团细胞占总细胞数的比值
Dead Cell Conc.: 死细胞浓度 [×105/mL]
Viable Cell Count: 测定活细胞数
Dead Cell Count: 测定死细胞数
Total Object Count: 全部测定数
Total Object Conc.: 总浓度 [×105/mL]
Avg Object Diameter: 测定总群体平均直径 [μm]
Avg Object Compactness: 所有测定群体与理想状态细胞形状的平均变异程度。
在单个样品结果表中,会有三项列在表头:
Image No.: 图像编号
Valid: 表示图像质量是否能够达到分析要求
Excluded: 复选框以排除或包括该样品在总结果表中的显示
2. 在柱形图中看结果:此结果不包括已经由上述复选框选择排除的计数结果
① 在测定界面点击HISTOGRAMS键,打开柱形图对话框;
② 可选择以下项目:
成团细胞柱形图
细胞直径柱形图
细胞形状均一度柱形图
总群直径柱形图
六、 查看图像
单副图像:在测定界面的右侧显示的是选定的单个样品测定结果所对应的图像;
多幅图像:在图像显示区点击VI
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