《10HER2检测指南建议》第三部分.ppt

* * 第三部分:取材与组织固定 组织准备 Key tissue preparation steps include 标本采集 固定 酸化脱钙 石蜡包埋 切片 脱蜡 准备ISH或IHC aOnly required in bone metastases or calcified tissues, not compatible with IHC Decalcification and paraffin embedding（脱钙和石蜡包埋） Acid decalcification（脱酸钙） required for breast calcifications or bone metastases 需要乳房钙化或骨转移 procedures must be validated prior to use on clinical specimens 必须验证程序在使用前对临床标本 not compatible with IHC testing 免疫组化检测不兼容 Paraffin embedding 石蜡包埋 tissue samples are dehydrated in an ethanol / xylene seriesand embedded in paraffin 组织样品在乙醇脱水，二甲苯系列和石蜡包埋 prolonged incubation in molten paraffin should be avoided as high temperatures may degrade antigenicity 在熔化的石蜡，应避免长时间的孵化温度可降低高抗原性 paraffin-embedded samples can be stored indefinitely prior to sectioning 石蜡包埋样品可以无限期储存之前切片 Sectioning and deparaffinisation Sectioning 切片 ideally, sections should be cut from the tissue block immediately prior to HER2 testing 理想情况下，切片在切下组织块后立刻进行HER2基因检测。 sections must be cut from the invasive component of the tumour and confirmed with a haematoxylin and eosin section部分必须切断肿瘤的侵袭组件和一个苏木和曙红节确认 thickness of tissue sections can affect interpretation of results; ensure sections are cut to 4-5 microns 组织切片的厚度会影响结果的解释，确保路段减少到4-5微米 sections are mounted on slides and dried for 12-24 hours at room temperature or 1 hour at 60°C 部分安装在滑梯、室温干燥12-24小时或60℃1小时。 Deparaffinisation 脱蜡 sections are deparaffinised and rehydrated in a xylene / ethanol series 切片脱蜡和二甲苯复水/乙醇系列 ensure complete removal of paraffin; residual paraffin will increase non-specific staining 确保完全去除石蜡，石蜡残留会增加非特异性染色 标本的类型：手术切除标本 粗针穿刺标本 冷冻后的标本 改良根治术乳腺癌标本 新辅助化疗乳腺癌标本 保乳术乳腺癌标本 固定前标本处理 转移性乳腺癌：如果可以取得转移灶活检标本，转移灶活检标本比原始标本更有价值 固定前标本处理 对所有标本在离体1小时以内进行固定 乳腺标本在手术切除、大体观察和切缘标记后立即切为5mm至10mm厚的薄片并予固定，标本切除和固定之间的时间间隔尽可能短 可使用纱布或滤纸将相邻的组织片分开，保证固定液的充分渗透和固定 如肉眼能确定的肿瘤，尽快取一小块肿瘤和正常乳腺组织放入包埋盒并立刻进入固定液 注：手术切除标本的固定步骤 标本定位，根治术标本，以腋窝的脂肪组织作为外侧的标志，皮肤 朝上，以6点的部位最靠近取材医师（如同取材医师面对患者） 判断乳腺标本的外观特点并测量记录，确定标本的四个象限并标注： 外上、