霉菌观察实验报告.doc

微生物实验报告 题目：霉菌的形态观察 姓名：余振洋 学号：200900140156 系年级：09生科3班 组别：周三4组 同组者：张刚刚、岳永胜、俞华军、谢英健 时间：2010年11月10日 一、【实验目的】 1、学习并掌握观察霉菌形态的基本方法 2、了解四类常见霉菌（曲霉、毛霉、青霉、根霉）的基本形态特征 二、【实验原理】 1、霉菌 霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约 3~10μm ），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。 2、观察方法 观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，本次实验采用载玻片培养观察法（小室培养法）。 3、载玻片培养观察法（小室培养法） 用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。 三、【实验器材】 1、菌种：曲霉 ( Aspergillus sp. ) ，青霉，根霉 ( Rhizopus sp. ) ，毛霉（ Mucor sp. ），培养 7d 的马铃薯琼脂平板培养物 2、培养基：马铃薯培养基（简称PDA）（配方见附表） 3、仪器或其他用具：平皿，载玻片，盖玻片，无菌吸管，U 型玻棒，解剖刀，镊子，50%乙醇，20%甘油，显微镜，接种环，酒精灯等 四、【操作步骤】 1、载玻片培养观察法（小室培养法） （1）、培养小室的灭菌：在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一Ｕ形玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖，包扎后于110℃灭菌20~30分钟，烘干备用。 （2）、琼脂薄片的制作：取已灭菌的马铃薯琼脂培养基各6~7ml 注入另两个灭菌平皿中，使之凝固成薄层。通过无菌操作，用解剖刀将其切成 1cmx1cm的琼脂块，并将其移至上述培养室中的载玻片上（每片放两块 )。 （3）、接种：通过无菌操作，用接种环从斜面培养物上挑取很少量的孢子，接种于培养小室中琼脂块的边缘上，用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。 （3）、培养： 通过无菌操作，在培养小室中的圆滤纸上加 2～3ml 灭菌的20 %的甘油（用于保持平皿内的湿度 ) ，盖上皿盖，27 ℃ 正置培养一周。 （4）、镜检：根据需要可以在不同的培养时间内取出载玻片置低倍镜下观察，必要时换高倍镜。 五、【注意事项】 1、载玻片培养观察中，注意无菌操作，接种量要少，同时尽可能将分散的孢子接种在琼脂块边缘上，否则培养后菌丝过于稠密影响观察 。 六、【实验结果及绘图】 菌种曲霉根霉毛霉青霉 形态特征 营养菌丝具有分隔；气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗，顶端膨大成球状顶囊，表面辐射出一层或两层小梗，小梗上着生成串的球形分生孢子。分生孢子梗生于足细胞上，并通过足细胞与营养菌丝相连。菌丝无隔、多核、分枝状，有匍匐菌丝和假根。在假根的上方直立地生长出一至数根孢囊梗，其顶端膨大成球形孢子囊。囊的基部有囊托，中间有球形或半球形囊轴。囊内产大量孢囊孢子，有性生殖时由不同性别的菌丝或匍匐菌丝上生出配子囊，配子囊双双异宗配合形成一接合孢子。菌丝无隔、多核、分枝状，无假根或匍匐菌丝。菌丝体上直接生出单生、总状分枝或假轴状分枝的孢囊梗。各分枝顶端着生球形孢子囊，无囊托。菌丝有横隔，分生孢子梗亦有横隔，光滑或粗糙。基部无足细胞，顶端不形成膨大的顶囊，其分生孢子梗经过多次分枝，产生几轮对称或不对称的小梗，形如扫帚，称为帚状体。小梗顶端有孢子。 四种霉菌形态特征表 【绘图】 孢囊孢子 球形孢囊 孢囊梗 毛霉菌局部放大图 毛霉菌 10x10 分生孢子梗 足细胞 分生孢子梗及足细胞 10x40 曲霉菌 10x10 球状顶囊 分生孢子梗 球状顶囊及孢子梗 10x40 孢囊梗 匍匐菌丝 孢子囊 假根 根霉菌假根 10x40 匍匐菌丝 孢子囊 根霉菌 10x10 青霉菌 10x10 帚状分生孢子及小梗、梗端孢子 帚状分生孢子 青霉菌 10x10 七、【思考题】 1、黑曲霉和黑根霉在形态特征上有何区别？ 答：根霉属：菌丝无隔，菌丝体产生匍匐枝，匍匐枝末端长有假根。 曲霉属：菌丝体分枝并具有横隔，分生孢子从分化了的菌丝（具有厚壁的足 细胞）上直立长出。分生孢子的形状、大小、颜色和纹饰都是鉴别 曲霉种的重要依据。 【附表】马铃薯培养基配方（PDA） 马铃薯200g