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不同方法测定牛奶中环丙沙星残留 　　摘 要：采用微生物法、酶联免疫法、高效液相色谱法同时测定鲜奶中环丙沙星的残留，结果表明： 微生物法适合牛奶收储时抗菌药物残留的初筛；酶联免疫法能够较精确地测定奶中环丙沙星的残留，但其费用昂贵，高效液相法适合质监部门和大型企业应用。 　　关键词：牛奶；高效液相法；微生物法；酶联免疫法；残留检测 　　中图分类号：S859.79+6 文献标识码：A DOI编码：10.3969/j.issn.1006－6500.2012.02.009 　　 　　Detection of Ciprofloxacin Residue in Milk with Different Methods 　　LIU Jia-mu 1，TAN Ai-juan1， LV Shi-ming2，JIN Zhi-qiang3 　　(1. College of Life Sciences, Guizhou University，Guiyang，Guizhou 550025,China;2. College of Animal Science, Guizhou University, Guiyang，Guizhou 550025, China；3. Agriculture Committee of Guiyang City, Guiyang ，Guizhou 550081，China） 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ: The ciprofloxacin residues in milk were simultaneous determined with the microbial test method, Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay (ELISA) and High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The result showed that the microbial test method was suitable for primary screening detection of antibacterial residues in the process of milk collection. The ciprofloxacin residue in milk was determined accurately by the method of ELISA, and the cost of ELISA test was more expensive. The method of HPLC for testing ciprofloxacin residue in milk was accurate and quick, it was suitable for applying in qualitative inspect branch and large enterprise. 　　Key words: milk; HPLC；the microbial test method；enzyme immunoassay ; residue detection 　　 　　牛奶是人们尤其是婴幼儿的主要食品，牛奶中残留抗菌药物会危害饮用者的健康[1-2]。近年来，抗菌药物越来越广泛地用于牛奶生产，如广谱的氟喹诺酮类，高效、价廉的青霉素被广泛用于奶牛疾病和乳房炎的防治[3-4]，因此，牛奶中抗生素残留问题日益受到国际社会的重视。本研究应用3种不同方法测定了贵阳市市售鲜奶中环丙沙星的残留。 　　1 材料和方法 　　1.1 材 料 　　1.1.1 鲜奶样品 贵阳市市售生鲜乳24份。菌株：嗜热乳酸链球菌（沈阳森科生物医药有限公司）。 　　1.1.2 药品 色谱级甲醇、色谱级乙腈（天津康巢科技公司），氟罗沙星标准品、环丙沙星标准??（纯度大于98%，上海盛思生化科技有限公司），环丙沙星检测试剂盒（美国，RD Systems公司）；2，3，5一氯化三苯四氮唑（TTC）、氯化铜、稀硫酸、酸化乙腈等均为分析纯试剂。 　　1.1.3 仪器 Waters600高效液相仪和2876紫外检测器（美国waters公司），高速离心机（北京医用离心机厂），板式酶标仪（北京市新风技术有限公司）。 　　1.2 方 法 　　1.2.1 微生物法（TTC法）检测牛奶中抗生素残留[3-4] 嗜热乳酸链球菌液准备：活化好的嗜热乳酸链球菌接种于已灭菌的脱脂牛奶中，培养15 h，再用灭菌脱脂乳以1∶10的比例稀释菌液，备用。 　　抗菌药物残留的测定：取5 mL生鲜牛奶，巴氏灭菌，冷却至37 ℃，加入1 mL菌液，37 ℃水浴2 h，加入TTC试剂100 μL，37 ℃水