乌拉尔甘草愈伤组织石蜡切片与半薄切片对比.docVIP

乌拉尔甘草愈伤组织石蜡切片与半薄切片对比 　　摘要：以乌拉尔甘草（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ ｕｒａｌｅｎｓｉｓ Ｆｉｃｈ．）不同来源愈伤组织为材料，采用石蜡切片和半薄切片技术，对乌拉尔甘草不同来源愈伤组织细胞进行了观察，结果表明，半薄切片在制作不同来源愈伤组织装片时优于石蜡切片，其清晰度高，分辨率更为精确。石蜡切片中，根源愈伤组织有核细胞较少，而且细胞出现解体现象；半薄切片中观察到了叶源愈伤组织细胞中的着色颗粒、线粒体和圆球体，可为透射电镜制样提供有效的材料。 　　关键词：乌拉尔甘草；愈伤组织；石蜡切片；半薄切片 　　中图分类号：Ｓ５６７．７＋１；Ｑ９４３．１；Ｑ９４－３３６文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０11）12－2487-03 　　 　　Comparison of Paraffin Section and Semi-Thin Section of Glycyrrhiza uralensis Callus 　　 　　ＺＨＡＮＧ Ｘｉｎ１，ＣＡＯ Ｊｕｎ－ｍａｉ１，ＬＩＵ Ｊｉａｎ－ｌｉ１，ＺＨＡＮＧ Ｙａｎ２，ＺＨＥＮＧ Ｓｕ－ｊｉａｏ１ 　　（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｎｏｒｔｈ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｆｏｒ Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ， Ｙｉｎｃｈｕａｎ ７５００２１， Ｃｈｉｎａ； 　　２． Ｅｌｅｃｔｒｏｎ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｎｉｎｇｘｉａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｃｉｔｙ， Ｙｉｎｃｈｕａｎ ７５００２１， Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｃｅｌｌs ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｏｕｒｃｅｓ ｏｆ Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ ｕｒａｌｅｎｓｉｓ Ｆｉｃｈ． ｃａｌｌｕｓ ｗere ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｕｓｉｎｇ ｐａｒａｆｆｉｎ ｓｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｅｍｉ－ｔｈｉｎ ｓｅｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｔａｋｉｎｇ ｃａｌｌｕｓ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｏｕｒｃｅｓ ｏｆ Ｇ． ｕｒａｌｅｎｓｉｓ ａｓ ｔｒｉａｌ ｍａｔｅｒｉａｌ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｓｅｍｉ－ｔｈｉｎ ｓｅｃｔｉｏｎ ｗｈｉｃｈ ｈａｄ ｈｉｇ???ｅｒ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｌａｒｉｔｙ ｉｎ ｍａｋｉｎｇ ｓｅｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｏｕｒｃｅｓ ｏｆ ｃａｌｌｕｓ． Ｉｎ ｐａｒａｆｆｉｎ ｓｅｃｔｉｏｎ， ｃａｌｌｕｓ ｆｒｏｍ Ｇ． ｕｒａｌｅｎｓｉｓ ｒｏｏｔｓ ｈａｄ ｆｅｗ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｎｕｃｌｅｕｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｅｌｌｓ ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ ｔｈｅ ｄｉｓｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ ｐｈｅｎｏｍｅｎｏｎ； Ｃｏｌｏｒｅｄ ｐａｒｔｉｃｌｅｓ， ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ ａｎｄ ｓｐｈｅｒｏｓｏｍｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｓｅｍｉ－ｔｈｉｎ ｓｅｃｔｉｏｎ ｃｏｕｌｄ be ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｃｌｅａｒｌｙ， ｗｈｉｃｈ ｃｏｕｌｄ ｐｒｏｖｉｄｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｍａｔｅｒｉａｌ ｆｏｒ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ ｕｒａｌｅｎｓｉｓ Ｆｉｃｈ．； ｃａｌｌｕｓ； ｐａｒａｆｆｉｎ ｓｅｃｔｉｏｎ； ｓｅｍｉ－ｔｈｉｎ ｓｅｃｔｉｏｎ 　　 　　石蜡切片是组织学、发育生物学研究的主要试验方法，其优点是适合多数植物做组织切片观察，因而有关研究石蜡切片的报道文献较多［１－６］。半薄切片也是一种常用的制片技术，半薄切片制备中的一些关键技术如切片、捞片、脱脂、染色等环节直接影响半薄切片的质量；半薄切片在制作不同植物愈伤组织装片时优于石蜡切片，能较好地保存组织细胞的结构，其清晰度高，分辨率更为精确，但较石蜡切片成本高；而用于乌拉尔甘草（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ ｕｒａｌｅｎｓｉｓ Ｆｉｃｈ．）愈伤组织细胞结构观察的石蜡切片与半薄切片比较分析研究尚未见报道，为此开展了这方面的研究，现将结果报告如下。 　　１材料与方法 　　１．１材料 　　用乌拉尔甘草的根、芽、叶诱导的愈伤组织由北方民族大学细胞生物学实验室提供。染料有番红、固绿、甲苯胺蓝，试剂有冰醋酸、甲醛、二甲苯、石醋、３％戊二醛、０．１ ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲液（pH值6.8）、１％锇酸、梯度酒精（３０％、５０％、７０％、８０％、９０％、１００％）、环氧丙烷、环氧树脂、十二烷基琥珀酸酐、邻苯－二甲酸二丁酯、２，４，６－三甲氨基苯酚等，均为分析纯。仪器主要是Ｏｌｙｍｐｕｓ生物显微镜、实验型冰箱、温箱、包埋板、切片机等。 　　１．２方法