向日葵食用蛋白提取和SDS-PAGE电泳技术研究.docVIP

向日葵食用蛋白提取和SDS电泳技术研究 　　摘 要：以向日葵种子为材料，采用SDS电泳技术，以不同电泳条件对23种向日葵食用蛋白进行电泳谱带分析试验，研究不同电泳条件下向日葵食用蛋白的谱带变化，以选择出最佳的电泳条件。结果显示，最佳试验条件为：按照质量与体积比1∶3的比例用去离子水在4 ℃条件下30 min提取水溶性蛋白。电泳时，在4 ℃条件下进行，凝胶板厚度1 mm，分离胶浓度8%，浓缩胶浓度5%，电压300 V，加样量控制在10 μL。 　　关键词：向日葵；种子贮藏蛋白；聚丙烯酰胺凝胶电泳；品种纯度 　　中图分类号：S565.503.2 文献标识码：A DOI编码：10.3969/j.issn.1006－6500.2012.02.003 　　 　　Technical Study on the Edible Protein Extraction from Sunflower and Protein Analysis with SDSElectrophoresis 　　LIU Yu-xin1, JIN Li-zheng1, ZHANG Zhong-guo1, LU Fu-cheng1, SU Li-na2 　　(1. Tianjin Horticultural Engineering Institute，Tianjin 300384，China; 2.Tianjin Academy of Agricultural Sciences, Tianjin 300192, China) 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ: Taking sunflower seeds as materials, with different electrophoretic conditions, 23 kinds of edible sunflower protein electrophoresis band were analyzed by SDSelectrophoresis, in order to study the variations of electrophoresis protein bands of edible sunflower under different conditions and choose the best electrophoretic conditions. The results showed that optimum conditions were: according to the ratio of weight and volume 1∶3 , deionized water was used at 4 ℃ for 30 min to extract soluble proteins. Electrophoresis was done at 4 ℃ under the conditions of the gel thickness 1 mm, gel concentration of 8%, 5% stacking gel concentration, voltage 300 V, plus sample volume 10 μL. 　　Key words: sunflower;seed storage protein;polyacrylamide gel electrophoresis;varietal purity 　　 　　向日葵种子是优质食用油和优质蛋白质的重要来源之一[1]。它含有球蛋白、清蛋白和油脂体蛋白等丰富的蛋白质。目前，关于向日葵的蛋白分离、鉴定工作较少。Kumar等[2]运用SDS电泳对向日葵的杂交种进行对比分析, 并对杂种一代的遗传纯度进行鉴定。谢宗铭等[3]采用SDS电泳分离大量向日葵种子蛋白, 并将其应用于自交系和杂交种的鉴定, 获得良好效果。 　　食用蛋白即种子贮藏蛋白。自70年代以来,蛋??质电泳技术开始应用于种子品种鉴定和纯度检验,并得到迅速推广。国外研究多以高蛋白含量葵花籽为原料, 采用石油醚脱脂后再分离蛋白质[4]，笔者从不同品种向日葵种子的微量样品中获得蛋白质,并利用SDS电泳分离技术研究蛋白含量和种类的差异。本试验对向日葵种子贮藏蛋白的最佳提取方法和最佳SDS电泳条件的确定及SDS电泳技术在向日葵品种鉴定上的应用进行了研究。 　　1 材料和方法 　　1.1 试验材料 　　食葵：龙食葵、祥和；油葵：HA300(2002)、天龙黑油、2603、A01-6-7、89By-14、AS04-2、AS03-1-1、A04-5-3、PR29-9、PR29-8、PR29B、PR29-0607、HA89、td黑、吉35、HA300-55（C）、康地5号、89By-