05胚胎培养离体受精和存在问题.pptVIP

细胞工程 邢朝斌科技楼0510Tel:3726238E-mail:xingzhb@mail.edu.cn 第四章 植物组织器官培养技术 第三节 植物胚胎培养 概念：胚胎培养是指使胚或具胚器官在离体无菌条件下发育成幼苗的技术。 类型：包括胚培养、胚乳培养、胚珠培养、子房培养。 第三节 植物胚胎培养 胚胎培养的意义和类型 A 克服远缘杂交的不育性，获稀有杂种 B 打破种子休眠，缩短育种年限。 主要有以下两种： （1）使种胚发育不全的植物获得后代。 （2）使含抑制性物质不发芽的种胚发芽。 第三节 植物胚胎培养 胚胎培养的意义和类型 C 使生活力低下或无生活力的种子萌发 D 使柑橘类植物合子胚正常发育 E 获三倍体或单倍体植株 F 快速繁殖特殊植物 G 用于基础研究 第三节 植物胚胎培养 一、植物胚培养(embryo culture of plants) （一）、胚培养的概念与类型 概念：在无菌条件下将胚从胚珠或种子中分离出来，置于培养基上进行离体培养的方法 第三节 植物胚胎培养 一、植物胚培养 1成熟胚培养 第三节 植物胚胎培养 一、植物胚培养 2幼胚培养 幼胚是指子叶期以前的幼小胚 第三节 植物胚胎培养 一、植物胚培养 2幼胚培养 (1) 幼胚培养的关键技术： ①取材 球形胚至鱼雷形胚 第三节 植物胚胎培养 一、植物胚培养 2幼胚培养 (1) 幼胚培养的关键技术： ②幼胚剥离 保湿 迅速 ③培养条件的控制 第三节 植物胚胎培养 一、植物胚培养 2幼胚培养 （2）幼胚离体培养的生长发育方式 ①胚性发育： 幼胚接种到培养基上以后，仍然按照在活体内的发育方式发育，最后形成成熟胚，然后再按种子萌发途径出苗形成完整植株。 第三节 植物胚胎培养 一、植物胚培养 2幼胚培养 （2）幼胚离体培养的生长发育方式 ②早熟萌发： 幼胚接种后，在培养基上迅速萌发成幼苗。有时会形成许多胚状体，从而形成许多植株，这种现象称为丛生胚现象。 第三节 植物胚胎培养 一、植物胚培养 2幼胚培养 （2）幼胚离体培养的生长发育方式 ③愈伤组织： 一般来讲由胚形成的愈伤组织大多为胚性愈伤组织，这种胚性愈伤组织很容易分化形成植株。 第三节 植物胚胎培养 一、植物胚培养 2幼胚培养 （3）离体幼胚培养的影响因素 ①培养基 培养基类型 渗透压 第三节 植物胚胎培养 一、植物胚培养 2幼胚培养 （3）离体幼胚培养的影响因素 ②附加物： a、氨基酸类 b、维生素类 c、天然提取物 d、生长调节剂 第三节 植物胚胎培养 一、植物胚培养 2幼胚培养 （3）离体幼胚培养的影响因素 ③环境条件 初期弱光和黑暗 温度为该植物种子萌发的适宜温度 第三节 植物胚胎培养 一、植物胚培养 2幼胚培养 （3）离体幼胚培养的影响因素 ④培养材料 基因型和胚发育程度胚的发育阶段 第三节 植物胚胎培养 二、子房培养 授粉前子房培养 授粉后的子房培养 第三节 植物胚胎培养 二、子房培养 1．材料的选择? （1）品种间的差异? （2）胚囊发育时期：八核胚囊和成熟胚囊期的子房 第三节 植物胚胎培养 二、子房培养 2．培养基? （1）基本培养基 （2）植物生长调节物质 （3）蔗糖浓度 3.接种方式? 极性 营养吸收 第三节 植物胚胎培养 三、被子植物胚乳培养 1．概况? A、胚乳细胞的全能性。 B、能否通过胚乳培养获得三倍体； C、研究胚和胚乳的关系。 第三节 植物胚胎培养 三、被子植物胚乳培养 2．植物胚乳的发育特性? 植物胚乳可以分为两大类： 被子植物胚乳是双受精的产物。 裸子植物胚乳在受精前就已形成。 第三节 植物胚胎培养 三、被子植物胚乳培养 3．影响胚乳培养的因素 （1）胚乳的发育时期： 旺盛生长期为最佳时期。 （2）基因型? （3）培养条件 （4）胚因子 第三节 植物胚胎培养 三、被子植物胚乳培养 4．胚乳培养的形态发生 愈伤组织形成 直接进行器官分化 第四节 植物的离体受精 一、离体受精的概念和意义 从花粉萌发到受精形成种子，从种子萌发到幼苗形成的整个过程，均在试管内完成，称为离体受精，或试管受精。  克服自交不亲和性和远缘杂交障碍 为外源特异基因的有性转移，诱导遗传变异开辟了一条新途径。 第四节 植物的离体受精 二、离体受精的方法 （一）收集花粉参照花粉培养 （二）剥取子房或胚珠 做母本的花蕾在开花前数天去雄并套袋 第四节 植物的离体受精 二、离体受精的方法 （三）离体受精的方法 1、子房