三叶青叶指纹图谱研究及种酚类成分含量测定.docxVIP

三叶青叶指纹图谱研究及8种酚类成分含量测定　　[摘要]采用超高效液相色谱建立三叶青叶指纹图谱，并同时测定8种酚类成分（新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异荭草苷、荭草苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆苷、异牡荆苷）的含量，为三叶青叶质量评价提供依据。采用UHPLC法，Welch UHPLC Ultimate XB-C18色谱柱（4.6 mmtimes;150 mm， 2.7 mu;m），流动相为乙腈-0.1%甲酸（含5%甲醇）水梯度洗脱，流速0.4 mLmiddot;min-1，柱温30 ℃，采用国家药典委员会“相似度评价软件2004AB”处理分析，建立41批不同产地三叶青叶的指纹图谱，共标定15个共有峰并对不同产地进行聚类分析，然后选择其中8个主要的酚类成分作为定量指标，建立UHPLC同时测定8种主要酚类成分含量的方法，经方法学验证该研究建立的三叶青叶指纹图谱和8种酚类成分含量测定方法简便有效、灵敏、准确，可为综合评价三叶青叶的质量提供参考。　　[关键词]三叶青叶； UHPLC； 指纹图谱； 含量测定　　[Abstract]A novel method combining ultra-high performance liquid chromatography （UHPLC） fingerprint and simultaneous quantitative analysis of eight phenolic components was developed and validated for quality evaluation ofTetrastigma hemsleyanum leaves. For fingerprint analysis， 15 peaks were selected as the common peaks to evaluate the similarities among 41 batches ofT. hemsleyanum leaves collected from different regions. Additionally， simultaneous quantification of eight markers， including neochlorogenic acid， chlorogenic acid， cryptochlorogenic acid， isoorientin， orientin， vitexin-2-O-rhamnoside，vitexin and isovitexin， was performed and the obtained data demonstrated that our method has achieved desired linearity， precision and accuracy. Clustering statistical analysis was further application inT. hemsleyanum leaves from different regions. The results indicated that new approach conbine ultra-high performance liquid chromatography （UHPLC） fingerprint and simultaneous quantitative analysis of eight phenolic components was applicable in quality control ofT. hemsleyanum leaves.　　[Key words]Tetrastigma hemsleyanum leaves； UHPLC； fingerprint analysis； quality control　　doi：10.4268/cjcm　三葉青是我国特有的珍稀药用植物，为葡萄科崖爬藤属植物三叶崖爬藤Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg，以块根或者全草入药，具有清热解毒、祛风化痰、活血止痛的功效[1]，并广泛用于多种国药准字中成药，如排石利胆胶囊、华佗风痛宝、结石康胶囊等。前期课题组已经针对三叶青的块根进行了质量评价[2-4]，但由于三叶青对生长环境的要求较为苛刻，在自然条件下生长缓慢，加上近年来针对三叶青块根人为无节制的采挖，野生的三叶青已经成为濒危药用植物[5]，目前多数三叶青药材的使用多为块根部位，对三叶青叶资源的开发利用的报道较少，而现代药理研究表明三叶青叶也具有抗炎、镇痛、解热、抗肿瘤、抗病毒、调节免疫[6-7]等作用，同时也是结石康胶囊等中成药的直接原