Charm Ⅱ放射免疫法快速检测虾中磺胺类药物残留.doc

Charm Ⅱ放射免疫法快速检测虾中磺胺类药物残留 lt;品曩工业》?2006歪囊27一囊6期检 Oharrn¨放射曼疰法快逮捡潮虾III囊t羹药栩残■ 林杰黄晓蓉郑晶汤敏英陈彬陈健 摘要探讨应用CharmII放射免疫分析方法检测虾中磺胺类药物残留,确定制样和控制点设 定的方法,评价了免疫反应体系的灵敏度和特异性,验证了磺胺类最大残留限量为50~g/kg的检测稳 定性.90min可出检测结果. 关键词CharmlI放射免疫分析方法;磺胺类;虾 中图分类号S816.17 RapiddetectionofsulfonamidesinshrimpbyCharmⅡradioimmunoassaymethod LinJie,HuangXiaorong,ZhengJing,TangMinying,ChenBin,ChenJian AbstractRapiddetectionofsulfonamidesinshrimpbycharmIIradioimmunoassaywasstudied.Ex— tractionprocedureforshrimpandcontrolpointareconfirmed.Theimmunoassaysensitivityandspecificity ofthiscompetitivesystemarediscussed.Thestabilityofdetectionformaximumresiduelimit50p~g/kgis validated.Thewholedetectionprocesscouldbefinishedwithin90min. KeywordCharmIIradioimmunoassaymethod;sulfonamides;shrimp 国际上对动物源性食品的安全性要求越来越高. 国际食品法典委员会(CAC)和欧美等大多数国家规 定食品和饲料中的磺胺类药物总量及磺胺二甲基嘧 啶等单个磺胺类药物的含量不得超过0.1mg/kg,日本 规定食品中不得检出磺胺类药物.磺胺类药物(Sul— fonamides.SAs)是指具有对氨基苯磺酰胺结构的一类 药物的总称.是一类用于预防和治疗细菌感染性疾病 的化学治疗药物.通过任何途径摄入的SAs都会在人 体中蓄积,其残留能破坏人的造血系统,造成溶血性 贫血症,粒细胞缺乏症,血小板减少症等.过敏反应病 人中.轻者引起皮肤瘙痒和荨麻症,重者引起血管性 水肿.严重的过敏病人甚至出现死亡.能导致许多细 菌产生抗药性,对人类的身体健康产生很大的危害. 磺胺类药物检测方法有许多种,包括气相色谱法,液 相色谱法,薄层色谱法,电分析法,电位滴定法,酶联 免疫分析法,容量分析法,电导光谱法,分光荧光法, 分光光度法和亚硝酸盐法等.但是这些检测方法都存 在处理方法繁琐,操作时间长及只能检测单个磺胺类 药物的问题.基于细菌受体分析的Charm11放射免疫 林杰,福建出入境检验检疫局技术中心,工程师,350001, 福建省福州市湖东路312号. 黄晓蓉,郑晶,汤敏英,陈彬,陈健,单位及通讯地址同第 一 作者. 收稿日期:2006—01—19 法的样品前处理提取方法简便.具有灵敏度高,特异 性强的特点.并且可以检测磺胺类残留总量,已经为 欧盟国家和美国FDA认可并且应用于初筛分析.目 前国内尚未见有关虾的检测报道.本研究建立了虾类 中磺胺类残留的Charm11放射免疫检测方法. 1材料和方法 1.1设备和材料 Charm6600/7600分析仪(美国Charm公司生 产),IEC离心机,均质器,涡旋混合器,恒温孵育器 【(65~1)oC,(80~2)~C],闪烁液加液器,50ml离心管,硼 硅玻璃试管及试管塞,pH试条,药片压杆. 1.2样品和试剂 1.2.1检测基质 检测的基质为虾. 1.2.2检测试剂 磺胺类Charm11检测试剂盒,闪烁液(Optifluor), 阴性对照液,多抗标准品.以上试剂均由美国Charm 公司提供;磺胺二甲基嘧啶(SM2),磺胺甲基嘧啶(SM), 磺胺喹嗯啉(SQ),磺胺间甲氧嘧啶(SMM),磺胺甲氧嘧 啶(SM),磺胺间二甲氧哒嗪(SDM),磺胺吡啶(SPD),磺 胺二甲异曝唑(SIZ),磺胺甲基异嗯唑(SMZ),磺胺嘧啶 (SD),磺胺苯吡唑(SPP),磺胺甲氧哒嗪(SMP),磺胺氯 哒嗪(scP)等磺胺类药物标准品由Sigma公司提供;四 环素,氯霉素,氨苄青霉素,卡那霉素标准品由Sigma 公司提供. 1.3方法 霖林杰等:CharmII放射免疫法快速检测虾中磺胺类药物残留 1.3.1测试原理 测定的基础是竞争性受体免疫反应.用『H1标记 的磺胺二甲嘧啶(示踪剂)与样品中磺胺类药物的竞 争结合试剂(微生物细胞上的特异性受体)上的磺胺 结