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FP248的基因结构及其与肝癌相关性的研究中文摘要 FP248的基因结构及其与肝癌相关性的研究 中文摘要 为了获得肿瘤相关基因，我们实验室首创了一种基因组水平的高通量基因功能筛 选技术平台，寻找与细胞增殖和存活直接相关的基因…。FP248就是以这种方法 从胎儿eDNA文库筛选得到的一个新基因。 基因FP248(GertBank 2978个核苷酸，编码含有208个氨基酸的蛋白，蛋白N端含有信号肽序列。至 今未发现同源的核苷酸序列和氨基酸序列，因此至今为止仍然是一个新基因瞳1。 亚细胞定位观察FP248蛋白主要定位于细胞质中。Southernblot结果显示检测的 6对肝癌和癌旁组织样品中FP248在肝癌组织中均有很明显的基因扩增(100％)， Northern 胞的克隆形成。建立稳定株后，通过MTT法绘制生长曲线，发现FP248可促进 细胞的体外生长；软琼脂实验表明FP248也促进SMMC一7721细胞的克隆形成。 两次裸鼠成瘤实验均显示FP248的过表达可促进细胞体内的裸鼠成瘤。由此可 见，FP248对SMMC．772l细胞的生长具有促进作用，以上的实验给了我们一致 性的结果，由此我们可以推断FP248在肝癌的发生发展中具有重要的作用。 为了探索FP248基因促进肝癌细胞生长的分子机制，我们还进行了含有人588 个基因人Atlas膜杂交，希望得到FP248基因调节的关键因子或相关基因。结果 复旦大学 上海市肿瘤研究所 硕上研究生论立 FP248的基因结构及其与肝癌相关性的研究中文摘要 显示，上调基因中涉及到许多具有促进细胞生长作用的基因，包括癌基因，转录 因，下调的基因数量少，倍数也低，基因作用也各种各样。半定量RT-PCR对表 beta 1)进行了验证，结 达水平有变化的几个基因(CDK2，profoldin，integfin beta1下调，与Arias杂交的结果一致。 果发现CDK2，profoldin上调，in．grin 通过对Atlas膜片杂交结果的分析，我们可以看到，FP248对肿瘤细胞生长和增 殖的促进作用占主导地位，同时在细胞粘附，转移，代谢等方面可能也有一定作 周期相关的蛋白，因此进行了同步化后细胞周期的测定，不同时间点的周期测定 发现，与对照组并无显著性差异，因此FP248基因发挥作用的机制是通过另外 的途径。 关键词：肝癌；FP248基因；生长促进；基因表达，SMMC一7721细胞株 中图分类号：R735．7 复旦大学 上海市肿瘤研究所 硕士研究生论文 FP248的基因结构及其与肝癌相关性的研究英文摘要 Characterizationof cDNAofFP248andits full-length relationto Carcinoma Hepatocellular ABSTRACT Inordertofindthenovel relatedto genes Hepatocellularcarcinoma(HCC)，our initiateda transfectionforcancer-related eDNA laboratory large—scale screening genes ThenovelFP248wasisolatedfromahumanfetalcDNA thismethod． gene libraryby No．370371)