《真菌的实验诊断》课件.pptVIP

* 两种试验敏感性、特异性相当 都可以在早期诊断侵袭性曲霉病，但是?－D－葡聚糖可能出现更早 两者结合，可以互补 弥补GM假阴性可能 同样在粒细胞缺乏患者用的多，其他患者有待研究 半乳甘露聚糖(GM)与?－D－葡聚糖的比较 * 血清抗体检测 由于患者存在免疫受损，抗原递呈功能和及淋巴细胞功能受损，不能产生足够的抗体。 诊断价值较低。 * 系统性真菌感染诊断的进展 * 检测真菌的特异性酶 白念—N-乙酰?-D半乳糖苷酶 白念—脯氨酸按肽酶 都柏林念珠菌 N-乙酰?-D半乳糖苷酶 克柔 酸性磷酸酶 热带 吡烙磷酸酶 平滑 ?-D半乳糖苷酶 新生隐球菌 酚氧酶 * P C R 通过扩增曲霉菌特异基因片断，达到快速诊断的目的，但容易污染。 * PCR诊断侵袭性真菌病 一种可能的全真菌检测方法 可能用来进行血清学筛查（早期诊断） 方法和标本不同，敏感性及特异性不同 底线： 有诊断潜能，但还不是最佳的方法 Alexander B, Transpl Infect Dis, 2002,(supply 3):32 * 发热期间至少有一瓶血培养真菌阳性 持续稳定的血念珠菌抗原阳性 或高的抗念珠菌抗体滴度(ELISA) 真菌菌血症实验室诊断指标： * 需要解决的问题…… 重视基础真菌学检验，将直接镜检与真菌培养方法联合应用； 注重寻找组织学证据这一诊断的“金标准”，寻找病原真菌入侵机体的直接证据； 对诊断新方法应严格评价并对其进行标准化和规范化； 加强临床与实验室之间、实验室与实验室之间的交流与协作。 * 微生物标准-1 痰液或支气管肺泡灌洗液培养呈霉菌（包括曲霉属、镰刀霉属、接合菌和放线菌属等）或新生隐球菌阳性； 痰液或支气管肺泡灌洗液经直接镜检或细胞学检查，发现霉菌或隐球菌； 鼻窦抽取液直接镜检或细胞学检查，或培养呈霉菌阳性 * 微生物标准-2 血液真菌培养阳性 无菌体液中，经直接镜检或细胞学检查，发现除隐球菌外的其它真菌 未留置尿管的情况下，连续两份尿样培养均呈酵母菌阳性 未留置尿管的情况下，尿检见念珠菌管型 * 微生物标准-3 支气管肺泡灌洗液、脑脊液或2份以上的血液样品呈曲霉抗原阳性 肺部异常，与下呼吸道感染的相关标本中（血液、痰液和支气管肺泡灌洗液等）却无法培养出任何致病菌。 * 小结 1 建立完善的真菌实验室：鉴定，药敏 2 提高送检率和送检合格的标本，实验室前质控： “活检病理标本＝微生物标本” 3 开展G 试验和GM 试验等免疫学检验 和分子生物学试验为临床提供多种可靠的实验诊断依据 * * * 092. CHROMagar Candida plate showing chromogenic colour change for C. albicans (green), C. tropicalis (blue), C. parapsilosis (white) and C. glabrata (pink). * 095. Fluconazole Etest and disk test for Candida albicans. * 095. Fluconazole Etest and disk test for Candida albicans. * 096. Fluconazole Etest and disk test for Candida albicans showing end point trailing effect. * * 液基稀释法 CLSI M27A2：致病性酵母菌 CLSI M38A：产孢丝状真菌 琼脂稀释法 纸片扩散法——CLSI M44-A E－test法 抗真菌药物体外敏感试验 * * E-test法：可用于酵母样真菌和丝状真菌 * 096 * 白色念珠菌 近平滑念珠菌 热带念珠菌 光滑念珠菌 * 白色念珠菌 近平滑念珠菌 热带念珠菌 光滑念珠菌 * 白色念珠菌 近平滑念珠菌 热带念珠菌 光滑念珠菌 * 白色念珠菌 近平滑念珠菌 热带念珠菌 光滑念珠菌 * 白色念珠菌 近平滑念珠菌 热带念珠菌 光滑念珠菌 * 白色念珠菌 近平滑念珠菌 热带念珠菌 光滑念珠菌 * 体外抗真菌药敏试验与体内疗效 90-60原则—MIC值与临床疗效 药敏试验敏感菌株：90%对治疗有效 药敏试验耐药菌株：60%对治疗有效 Mahmoud A.G, JCM 1996, 34:489-495；Rex J,CID 2002, 35: 982-989 * 真菌特异性抗原的免疫学检测