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第十五章蛋白质的合成，转运和加工 第一节 氨基酰-tRNA的形成及核糖体的作用 位点 一. 氨基酰tRNA分子的形成 氨基酸的活化 活化： aa + ATP + E* 氨基酰-AMP-E + PPi 转移： 氨基酰-AMP-E + tRNA aa - tRNA+AMP +E 二．氨酰tRNA 合成酶的鉴别功能 动力学校对（Kinetic profreading） 化学校对 （Chemical proofreading） 三 核糖体的作用位点 ⑴A位点（或称 acceptor site）可以进入 氨基酰-tRNA(aminoacyl-tRNA)。 ⑵ P位点(或称供位，donor site) 是被肽基 酰-tRNA(peptidyl-tRNA)所占据。 (3)E位点(Exit site) 脱酰tRNA(deacylated- tRNA)短暂地占据。 第二节 肽链的合成 一.在细菌中翻译的起始 ⑴IF-3是30S亚基与mRNA起始位点的特 异结合所必须的。 ⑵IF-2是特异地和起始tRNA结合并把它 带到起始复合体中。 ⑶IF-1仅作为完整的起始复合物的一部分,可能和起始复合物的稳定性有关,而不是提供任何识别特异成份。 2. 起始复合物的形成 (1) IF-3和核糖体30S rRNA结合 使16S RNA和mRNA的S-D顺序结合 a.使30S 保持游离 b.形成起始复合体 I (2) IF-2 + GTP + 氨酰甲硫氨酸 中间复合体。 (3) IF-1置换出 IF-3, 50S亚基可和30S亚基结合。 (4) 50S+30S 复合体III，释放IF-1,IF-2。 原核生物翻译起始因子 二. 起始tRNA的特点 翻译时的第一个密码子是怎样被识别的呢？ (一)小亚基上16SrRNA3′端的六核苷酸(3′-UCCUCC-5′） 和Shine-Dalgarno顺序（5′-AAACAGGAGG-3′）互补，相互结合，使下游的AUG起始密码子定位在P位上。 (二) 核糖体结合位点也含有一个信号起始密码子（initiation codon）－AUG。 起始和延伸Met-tRNAs的区别 ⑴两种tRNA本身有差别； ⑵氨基酸的状态不同。 fMet-tRNA与Met-tRNA有什么不同？ ⑴ Met-tRNAmMet在受体臂末端的一对碱基是GC，在fMet-tRNAfMet是CA，C可以和延伸因子IF-2结合。 ⑵tRNAfMet在反密码子环的茎上有3对G-C,若发生突变将会阻止其进入P位点。 ⑶tRNAfMet的反密码子环上的是A，tRNAmMet是烷基化腺嘌呤。 tRNAfMet TψC环端是A，tRNAmMet的相应位置是G，作用不清。 三真核生物蛋白质合成的起始 * * *