狗牙根居群遗传分化RAPD扩增片段频率分析.docVIP

狗牙根居群遗传分化RAPD扩增片段频率分析 　　摘要：狗牙根（Ｃｙｎｏｄｏｎ ｄａｃｔｙｌｏｎ Ｌ． Ｐｅｒｓ．）不同居群由南向北外部性状具有广泛的变异性，为明确其分化的分子基础，以收集到的２８份狗牙根为材料，用２０个随机引物（１０ bp）共扩增出３１8个ＲＡＰＤ多态性片段，平均每个引物１５．9个多态位点，在２４个居群中共检测到了４６个特异性片段；３种类型有８％的多态性片段明显不同；相似生境或同一地域的居群在一些位点上表现出相似或相同的变化。 　　关键词：狗牙根（Ｃｙｎｏｄｏｎ ｄａｃｔｙｌｏｎ Ｌ． Ｐｅｒｓ．）；遗传分化；ＲＡＰＤ 　　中图分类号：Ｓ５４３．９文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）13－2706-04 　　 　　Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｉｎ Ｂｅｒｍｕｄａｇｒａｓｓ Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ Ｂｙ ＲＡＰＤ Ａｎａｌｙｓｉｓ 　　 　　ＬIANG Ｙｕｅ－ｘｉａｎｇ１，２，ＬＩＡＮＧ Ｈｕｉ－ｍｉｎ１，ＸＩＡ Ｙａｎｇ３，ＹＡＮ Ｌｉ－ｐｉｎｇ３，ＬＩＵ Ｃｕｉ－ｌａｎ３ 　　（１．Agriculture Department of Ｊｉａｎｇｓｕ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｊuｒｏｎｇ ２１２４００， Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ； 　　２．Ｎｉｎｇｘｉａ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ，Ｙｉｎｃｈｕａｎ ７５０００２，Ｃｈｉｎａ； 　　３．Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ， Ｊｉｎａｎ ２５００１４， Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅｒｅ ｅｘｉｓｔｅｄ ａｂｕｎｄａｎｔ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｖａｒｉａｔｉｏｎ ａｍｏｎｇ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｏｆ bｅｒｍｕｄａｇｒａｓｓ（Ｃｙｎｏｄｏｎ ｄａｃｔｙｌｏｎ Ｌ． Ｐｅｒｓ．） ｆｒｏｍ ｓｏｕｔｈ ｔｏ ｎｏｕｔｈ． Ｔｏ ｒｅｖｅａｌ ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂａｓｅｓ ｏｆ ｉｔｓ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａ??ｉｏｎ， 314 ＲＡＰＤ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｆｒｏｍ ２８ ｓａｍｐｌｅｓ ｏｆ bｅｒｍｕｄａｇｒａｓｓ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ２０ ｐｒｉｍｅｒｓ（10nt）． Ｔｈｅ ｍｅａｎ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｗａｓ １５．7 ｐｅｒ ｐｒｉｍｅｒ． ４６ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｆｒｏｍ ２４ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｓｐｅｃｉｆｉｃ． ８％ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｅｖｉｄｅｎｔｌｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ｔｈｒｅｅ ｔｙｐｅｓ． Sｉｍｉｌａｒ ｏｒ ｉｄｅｎｔｉｃａｌ ｖａｒｉａｔｉｏｎｓ were represented ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｉｍｉｌａｒ ｈａｂｉｔａｔ ｏｎ ｃｅｒｔａｉｎ ｌｏｃｉ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｃｙｎｏｄｏｎ ｄａｃｔｙｌｏｎ Ｌ． Ｐｅｒｓ．； ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ； ＲＡＰＤ 　　 　　植物种群随地理距离的遗传分化，在形态、等位酶和ＤＮＡ等不同水平上已被许多研究者发现。最近许多研究发现，在植物种群中，遗传分化也在较小的地理范围内发生［１，２］。 　　狗牙根（Ｃｙｎｏｄｏｎ ｄａｃｔｙｌｏｎ Ｌ． Ｐｅｒｓ．）是暖季型多年生草皮型草种，属世界广布种［３］。生长于不同地理居群的狗牙根，在不同的土壤、水分、温度等生态因子的作用下，经过长期的适应和进化过程，在生长范围和习性上有极大的多样性，居群间产生了不同程度的分化［１，４］。 　　本项研究以收集到的２８份狗牙根，包括国内不同地方野生和坪用型及国外引进商业品种种质资源（居群）为材料，通过ＲＡＰＤ技术分析居群间引物扩增片段频率的变化规律及遗传变异性，并结合叶片形态特征，依据聚类分析划分的３种类型［５］找出同一类型或相似生境的特异性条带，为狗牙根的分类研究提供分子水平的参考，并为开展狗牙根分子育种研究奠定基础。 　　１ 材料和方法 　　１．１ 植物材料 　　供试的２８个狗牙根居群来源地及编号列于表１。其中S１～S１２号、S２２～S２８号为中国普通野生型品种，S１３～S２１号为坪用型品种。 　　１．２ ＲＡＰＤ分子标记 　　１．２．１植物基因组ＤＮＡ的提取从种质圃中的２８个狗牙根居群中，每个居群随机选取１０个单株，混和剪取新鲜幼嫩叶片１０～２０