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生物酶法提取沙棘果渣总黄酮工艺优化 　　摘要：用生物酶法提取沙棘（Ｈｉｐｐｏｐｈａｅ ｒｈａｍｎｏｉｄｅｓ）果渣中的总黄酮，通过单因素试验和正交试验优化提取工艺。结果表明，酶解体系各因素对总黄酮提取率影响的大小顺序为酶用量、酶解温度、酶解时间、ｐＨ，最佳提取条件为生物酶用量占沙棘果渣质量的４％、ｐＨ ５、酶解温度６０ ℃、酶解时间１２０ ｍｉｎ，料水质量比１∶３０，此条件下总黄酮提取率可达到０．７９６％。与有机溶剂回流法和超声波法相比，生物酶法所得沙棘果渣的总黄酮提取率分别提高了５１．９１％和４８．５１％。 　　关键词：生物酶法；沙棘（Ｈｉｐｐｏｐｈａｅ ｒｈａｍｎｏｉｄｅｓ）果渣；总黄酮；提取工艺 　　中图分类号：Ｒ２８４．２；Ｓ７９３．６ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）05－0983-03 　　 　　Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｉｏ－ｅｎｚｙｍｅ Ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ Ｔｏｔａｌ Ｆｌａｖｏｎｅｓ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ Ｍａｒｃ ｏｆ Ｓｅａ Ｂｕｃｋｔｈｏｒｎ 　　 　　ＸＵ Ｓｈｅｎｇ－ｙｕｎ１，ＺＨＡＯ Ｗｅｎ－ｊｕａｎ１，ＣＨＥＮ Ｗｅｉ－ｆｅｎｇ２，ＲＥＮ Ｐｉｎｇ１，ＱＩＮ Ｔａｏ２ 　　（１． Ｅｎｚｙｍｅ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ， Ｓｈａａｎｘｉ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｘｉ’ａｎ ７１０６００， Ｃｈｉｎａ； 　　２． Ｓｈａａｎｘｉ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｅｎｚｙｍｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｘｉ’ａｎ ７１０６００， Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｂｉｏ－ｅｎｚｙｍｅ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ａｐｐｌｉｅｄ ｆｏｒ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｅｓ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｍａｒｃ ｏｆ ｓｅａ ｂｕｃｋｔｈｏｒｎ（Ｈｉｐｐｏｐｈａｅ ｒｈａｍｎｏｉｄｅｓ）； ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉon ｃｒａｆｔ ｗａｓ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｂｙ ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ ａｎｄ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ． Ｔｈｅ ｒｅｓ???ｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｅｘｔｒａｃｔｉon ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｅｎｚｙｍｅ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ， ｅｎｚｙｍｅ ｄｏｓｅ， ４％ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｓｓ ｏｆ marc of ｓｅａ ｂｕｃｋｔｈｏｒｎ； ｐＨ， ５； Tｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ， ６０ ℃； Tｉｍｅ， １２０ ｍｉｎ； Mａｓｓ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｍａｔｅｒｉａｌ ｔｏ ｗａｔｅｒ， １∶３０． Ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ， ｔｈｅ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｅｓ ｗａｓ ｕｐ ｔｏ ０．７９６％． Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｈｅａｔ ｒｅｆｌｕｘ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｕｌｔｒａ－ｓｏｎｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ， ｔｈｅ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｂｉｏ－ｅｎｚｙｍｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｂｙ ５１．９１％ ａｎｄ ４８．５１％， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｂｉｏ－ｅｎｚｙｍｅ ｍｅｔｈｏｄ； ｍａｒｃ ｏｆ sｅａ ｂｕｃｋｔｈｏｒｎ（Ｈｉｐｐｏｐｈａｅ ｒｈａｍｎｏｉｄｅｓ）； ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｅｓ； ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ 　　 　　沙棘（Ｈｉｐｐｏｐｈａｅ ｒｈａｍｎｏｉｄｅｓ Ｌ．）又名醋柳，是胡颓子科沙棘属的多年生灌木，是极为珍贵的药食两用植物，其果实、枝杆、叶中含有多种生物活性物质和营养成分［１］。沙棘总黄酮是研究最多的沙棘活性成分之一，具有抗心肌缺血、降血脂、抗肿瘤，调节免疫系统等药理作用［２－４］。经过大量人工种植与对野生沙棘资源的合理保护与开发，中国已成为沙棘种植第一大国，沙棘资源的开发与利用为中国“三北”贫困地区农民增收脱贫发挥了巨大作用。目前我国中西部沙棘加工企业主要是用带短枝沙棘果实榨汁和取油，榨汁后产生的大量果渣常被丢弃，仅有少部分被用作廉价的饲料。而有研究表明，沙棘总黄酮在其果渣中的含量还相当高［５］，有的甚至高于其在果汁与油中的含量［６］。因此，研究沙棘果渣总黄酮的提取对延伸沙棘加工产业链，提升沙棘开发利用的经济价值具有积极意义。 　　已有的报道主要探讨了有机溶剂结合超声、微波、热加工等物理方法提取沙棘果渣中总黄酮的方法［５－８］，而生物酶法可利用酶的专一性高效降解并充分释放出原料中的总黄酮，可以提高提取率、减少有机溶剂用量、简化提取流程。本研究主要应用单因素试验和正交