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粪肠球菌F71增殖培养基优化研究 　　摘要 为达到增殖菌体的目的，对粪肠球菌F71进行了培养基优化正交试验。结果表明，最佳培养基的组成为：胰蛋白胨10 g/L，酵母粉10 g/L，葡萄糖 10 g/L，无水氯化钙0.04 g/L，七水合硫酸镁0.019 2 g/L，磷酸氢二钾0.04 g/L，磷酸二氢钾0.04 g/L，磷酸氢钠0.4 g/L，氯化钠0.08 g/L，土豆汁50 g/L，碳酸钙1 g/L，乙酸钠10 g/L，碳酸铵2 g/L，乙酸铵1 g/L，半胱氨酸盐酸盐0.5 g/L，pH值为9，最适培养温度为35 ℃。用此培养基进行增殖，F71的最高活菌数达到2.78×108 cfu/mL，比基础培养基提高了54.6%。 　　关键词 粪肠球菌；F71；增殖；培养基；优化；活菌数 　　中图分类号 Q93-335 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2012）03-0035-02 　　 　　Optimization of Multiplication Medium for Enterococcus faecalis F71 　　ZHOU Ying GAO Zi-lan YUAN Ling-nan ZHOU Jia-chun 　　（School of Biotechnology of East China University of Science and Technology，Shanghai 200237） 　　Abstract In order to realize the multiplication of isolates，the optimization experiment of medium for Enterococcus faecalis F71 was carried out by orthogonal design. The optimization of cultured medium of F71 was as follows：peptone 10 g/L，yeast extract 10 g/L，glucose 10 g/L，anhydrous calcium chloride 0.04 g/L，bitter salt 0.019 2 g/L，dipotassium hydrogen phosphate 0.04 g/L，monopotassium phosphate 0.04 g/L，monosodium phosphate 0.4 g/L，sodium chloride 0.08 g/L，juice of potato 50 g/L，calcium carbonate 1 g/L，sodium acetate 10 g/L，ammonium carbonate 2 g/L，ammonium acetate 1 g/L，cysteine hydrochloride 0.5 g/L. The optimal initial pH value of the medium was 9. F71 got to 2.78×108 cfu/mL in this culture for 16 hours at 35 ℃，and increased by 54.6% compared to the basic culture medium. 　　Key words Enterococcus faecalis；F17；multiplication；medium；optimazation；viable count 　　粪肠球菌是目前专用于微生物青贮接种剂主要菌种之一，并作为益生菌广泛用于畜牧生产中[1]，但对于粪肠球菌产多糖的研究较少。多糖具有降血脂、调节免疫功能、抗疲劳、抗辐射、抗肿瘤等作用，对于调节人体肠道功能具有明显效果，是一种较好的保健品添加剂。粪肠球菌胞外多糖在工业生产中由于其菌体产量低、容易降解而成为制约其大规模生产的瓶颈[2]，故菌体增殖为最基本的环节，筛选最适及效果最佳培养基，能够充分利用培养基营养基质，最大程度地提高单位活菌数，从而降低发酵成本[3]。本文对2株从自然环境中分离出来的粪肠球菌进行增殖培养研究，希望能为大规模工业化生产提供参考依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　供试菌种：粪肠球菌F71，实验室提供。基础培养基（BM）：胰蛋白胨10 g、酵母粉10 g、葡萄糖10 g、无机盐溶液40 mL，溶解煮沸，冷却后加入半胱氨酸盐酸盐0.5 g，加蒸馏水定容至1 000 mL，调节pH值为7。无机盐溶液：无水氯化钙0.5 g、七水合硫酸镁0.24 g、磷酸氢二钾0.5 g、磷酸二氢钾0.5 g、磷酸氢钠5 g、氯化钠1 g，将氯化钙和硫酸镁