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薄荷组织培养条件选择 　　摘要：考察了消毒方式、外植体部位、培养基配方等因素对薄荷（Ｍｅｎｔｈａ ｈａｐｌｏｃａｌｙｘ Ｂｒｉｐ．）组织培养的影响。结果表明，外植体先用体积分数７０％的乙醇处理３０ ｓ后，再用１ ｍｇ／Ｌ ＨｇＣｌ２+2滴吐温８０浸泡一定时间，消毒效果好于40 ｍｇ／Ｌ的漂白粉处理，适宜的ＨｇＣｌ２消毒时间分别为茎段、叶片、叶柄和已萌发的芽１２ ｍｉｎ；末萌发的芽１０ ｍｉｎ。茎段的不定芽诱导率和不定芽生长情况好于其他外植体。在薄荷旺盛生长期采集半木质化的茎段作为外植体进行诱导培养，不定芽萌芽早而且生长速度快。ＭＳ＋０．５0 ｍｇ／Ｌ ＢＡ＋０．１0 ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ是适合外植体不定芽诱导的培养基配方。 　　关键词：薄荷（Ｍｅｎｔｈａ ｈａｐｌｏｃａｌｙｘ Ｂｒｉｐ．）；外植体；组织培养 　　中图分类号：Ｓ５６７．２３＋５；Ｑ８１３．１＋２ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）07－1471-03 　　 　　The Ｏｐｔｉｍｉｚation of Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｍｉｎｔ Ｅｘｐｌａｎｔｓ 　　 　　ＭＡ Ｔｏｎｇ－ｆｕ１，２，CAI Jian1 　　（１． Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｆｕｙａｎｇ Ｔｅａｃｈｅｒｓ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｆｕｙａｎｇ ２３６０３７，Ａｎｈｕｉ，Ｃｈｉｎａ； 　　２．Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ａｎｔｉａｇｉｎｇ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｈｅｒｂ，Ｆｕｙａｎｇ ２３６０３７，Ａｎｈｕｉ，Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｔｅｒｉｌｉｚｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄｓ， ｅｘｐｌａｎｔ ｍａｔｅｒｉａｌ， ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒｍｕｌａ ｏｎ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ ｍｉｎｔ（Ｍｅｎｔｈａ ｈａｐｌｏｃａｌｙｘ Ｂｒｉｐ．） ｗａｓ ｓｔｕｄiｅｄ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ａｆｔｅｒ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｂｅｉｎｇ ｉｍｍｅｒｓｅｄ ｉｎ ７０％ ｅｔｈａｎｏｌ， 1 mg/L ＨｇＣｌ２＋Tｗｅｅｎ ８０ ｈａｄ ｂｅｔｔｅｒ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔ ｔｈａｎ 40 mg/L ｂｌｅａｃｈｉｎｇ ｐｏｗｅｒ． Ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｔｉｍｅ ｏｆ ＨｇＣｌ２ for ｓｔｅａｍ， ｌｅａｆ， ｌｅａｆｓｔａｌｋ and ｇｅｍｉｎａｔｅｄ ｂｕｓ ｓｈｏｕｌｄ ｂｅ １２ ｍｉｎ； 10 min for sｔｅａｍ， ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ ｓｔｅａｍ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｖｉｇｏｒｏｕｓ ｇｒｏｗｔｈ ｐｅｒｉｏｄ ｏｆ ｍｉｎｔ ａｓ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｈａｄ ｈｉｇｈｅｒ ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｒａｔｅ ｔｈａｎ ｏｔｈｅｒ ｅｘｐｌａｎｔｓ． ＭＳ＋０．５0 ｍｇ／Ｌ ＢＡ＋０．１0 ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ ｗａｓ ｔｈｅ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ buds induction of ｍｉｎｔ explants． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｍｉｎｔ（Ｍｅｎｔｈａ ｈａｐｌｏｃａｌｙｘ Ｂｒｉｐ．）； ｅｘｐｌａｎｔ； ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ 　　 　　薄荷（Ｍｅｎｔｈａ ｈａｐｌｏｃａｌｙｘ Ｂｒｉｐ．）为唇形科草本植物，中医学上以薄荷全草入药，其性凉、味辛，具有疏散风热、清利头目、理气解郁之功效，主治外感发热、风湿初起、头痛目赤、咽喉肿痛、皮肤瘾疹等症［１，２］。国内外有关薄荷离体培养的研究主要注重组织培养、微繁殖和原生质体培养等［３－７］。虽然任何器官、任何组织、单个细胞和原生质体都可以作为外植体［８，９］，但实际上，不同外植体的分化能力有很大差异，培养的难易程度不同［１０，１１］。为保证植物组织培养获得成功，选择合适的外植体是非常重要的［１２－１４］。本试验以薄荷顶芽、腋芽、叶片、茎段、叶柄为外植体，研究不同外植体及培养条件对薄荷组织培养的影响。 　　１ 材料与方法 　　１．１ 试验地点与材料 　　试验于２０１０年３月至２０１１年２月在阜阳师范学院生物技术应用研究所生物组培室进行。试验材料为阜阳市农业科学院培育的薄荷品系阜油９号。 　　１．２ 试验方法 　　１．２．１ 外植体的采集 2010年６月在田间选取健壮、生长势强、气味浓郁的植株作为处理材料。取薄荷新生枝的中部叶片，去除叶片部分后即得所需叶柄。腋芽消毒后剥去芽鳞，剥取８～１０ ｍｍ长的芽尖。芽用刀片从茎秆上切下。 　　１．２．２ 外植体的消毒 外植体采集后先用流水冲洗１０ ｍｉｎ，其中茎段需要用刷子刷洗几遍，然后用７０