木蹄层孔菌乙醇提取物体内抗肿瘤活性及其对荷瘤鼠免疫功能的影响.doc

木蹄层孔菌乙醇提取物体内抗肿瘤活性及其对荷瘤鼠免疫功能的影响 【摘要】目的研究木蹄层孔菌乙醇提取物（EEF）的体内抗肿瘤活性及其对荷瘤鼠免疫功能的影响。方法建立ICR鼠S180肉瘤模型，EEF3个剂量组灌胃给药，10天后pc计算抑瘤率、脾指数、胸腺指数及EEF对荷瘤鼠淋巴细胞转化能力、脾细胞抗体生成能力和NK细胞活性的影响。结果100、250、500mg·kg-1·d-13个剂量组的抑瘤率分别为38.5%、41.6%、59.5%，均能提高荷瘤鼠的脾指数，增强荷瘤鼠的淋巴细胞转化能力，脾细胞抗体生成能力，NK细胞活性。结论EEF有明显的体内抗肿瘤活性。 【关键词】木蹄层孔菌；抗肿瘤活性；免疫功能 Abstract:ObjectiveTostudytheanti-tumoreffectofethanolextractofFomesfomentarius(EEF)invivoanditsinfluenceonimmunologicalfunction.MethodsICRmicecarryingS180sarcomaweregiventhreedifferentdosesofEEF.Tendayslater,thetumor-inhibitoryrate,spleenindex,thymusindex,theabilityofspleniclymphocytetransformation,theformationofantibodyinspleniccellsandtheactivityofNKcellswereobserved.ResultsTheinhibitoryratesinthegroupstreatedwithEEF100,250and500mg·kg-1·d-1were38.5%,41.6%and59.5%,respectively.Themedicinecouldalsoobviouslyenhancethespleenindex,promotethespleniclymphocytetransformation,theantibodyformationinspleniccellsandtheactivityofNKcells.ConclusionExtractofFomesfomentariushasobviousanti-tumorabilityinvivo. Keywords:Fomesfomentarius;anti-tumoractivity;immunologicalfunction 木蹄层孔菌（Fomesfomentarius）是多孔菌科的一种大型药用真菌。子实体马蹄型，为民间抗癌药物，味微苦，性平，消积化瘀。子实体水煎服，可用于Medicine治疗食管癌、胃癌、子宫癌、小儿积食［1］。对该药的药理活性过去仅限于对其水提物的报道，尚未见深入研究的报道。本实验用木蹄层孔菌乙醇提取物（ethanolextractofFomesfomentarius，EEF）作用于体内的肿瘤细胞，旨在探讨EEF的体内抑瘤活性及其对荷瘤鼠免疫功能的影响。中草药的天然产物中存在着广泛的生物活性物质，如何从中草药中寻找毒副作用小，作用独特的抗肿瘤药物及抗肿瘤辅助药物［2］，发挥我国传统中药的优势将为肿瘤的治疗另辟蹊径，木蹄层孔菌作为传统的民间抗癌药物在肿瘤治疗方面有广阔的前景，值得深入研究。本实验旨在为这一传统药物的开发提供理论依据。 1材料和方法 1.1实验材料 1.1.1药品和试剂木蹄层孔菌（购自大连王力商行）碾碎用无水乙醇煮沸浸提2～3次，过200目滤网，所得浸膏冷冻干燥，得棕色粉末。临用前将粉末先溶于少量乙醇，再加吐温-80助溶，后用蒸馏水稀释到所需浓度；用于体外实验药物用1%DMSO+完全RPMI-1640培养基稀释。 新生小牛血清购自美国Hyclone公司，胰蛋白酶购自上海华美公司，噻唑兰（MTT）、二甲基亚枫（DMSO）、DNaseⅠ、RNase、刀豆蛋白A(ConA)为Sigma公司产品，环磷酰胺（江苏连云港恒瑞制药厂）。 1.1.2实验动物及肿瘤细胞株清洁级ICR鼠，雌雄各半，18～22g；S180腹腔积液瘤种鼠（购自中国医学科学院协和医科大学药物研究所），Hela细胞株购自军事医学科学院病毒研究所。 1.1.3主要设备CO2培养箱（SHELBA）、酶联免疫检测仪（Bio-RAD公司）、离心机（上海飞鸽离心机厂）、分析天平（Sartorius）、722可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)，FACSCalibur型流式细胞仪（BectonDickinson）。 1.2实验方法 1.2.1体内抗肿瘤实验及对免疫器官的影响参照文献［3］，无菌抽取接种7～8天的S180荷瘤鼠腹腔积液，用灭菌生理盐水稀释成1.0×1