【毕业论文】毛细管电泳用于药物血浆蛋白结合率和环丙氨基取代的核苷类似物脱氨机制的研究.doc

硕士研究生学位论文 毛细管电泳用于药物血浆蛋白结合率和研究 研 究 生： 学 号： 年 级：2006级六年制 学 院：北京大学药学院 专 业：药物分析 导 师：凌笑梅 教授 完成时间： 二○一二年五月毛细管电泳用于药物血浆蛋白结合率和的研究 研究生：林芊 导师： 凌笑梅 教授 北京大学医学部药学院药物分析专业 本论文主要设计一种使用毛细管电泳测定药物血浆蛋白结合率的新方法，并将其应用于三种不同药物的血浆蛋白测定。同时考查了两种新型核苷类似物前药肝脏代谢释放药物的过程。具体内容分为以下三个部分。 第一部分，首先综述了药物血浆蛋白结合率的基础知识和理论，进而总结药物与血浆蛋白结合的研究方法进展。其次，详细介绍各种体外肝代谢模型的特征及优缺点。最后，提出了实验的选题思路和立体依据。 第二部分，建立了一种使用毛细管电泳测量药物血浆蛋白结合率的新方法。并将此方法用于测量丙吡胺、SLXM-2、TM208等药物的血浆蛋白结合率。本方法通过分别测定血浆中游离药物及总药物浓度，最后计算得该药物的血浆蛋白结合率。在测量游离药物浓度时，无需对血浆样品进行任何处理，可以通过直接进样方便、快捷、准确的检测出其中的游离药物浓度。通过检测，丙吡胺的大鼠血浆蛋白结合率在62.59%-87.32%范围内，SLXM-2的大鼠血浆蛋白结合率在84.77%-79.07%范围内；由于TM208的水溶性极差，并未得到其血浆蛋白结合率数据。本方法快捷、简便、准确、高效，适用于有一定水溶性药物的血浆蛋白结合率的测定，具有高通量检测的潜力。 第三部分，考查了两种新型环丙氨基修饰的核苷类似物前药（cyclo-ddG、cyclo-d4G）肝脏代谢释放药物的过程。通过预平衡的方法，使用小鼠肝匀浆代谢模型，采用高效毛细管电泳、高效液相等分析检测手段，考查了两种前药释放有效药物的过程。除有效药物外，检测出一种代谢中间体的存在，推测环丙氨基修饰的核苷类似物前药的体内激活过程可能由两步反应构成。 关键词：[血浆蛋白结合率]；[直接进样]；[丙吡胺]；[体外肝代谢]；[毛细管电泳]。 Novel methods for the determination of plasma protein binding and drug metabolism by capillary electrophoresis M.D.Candidate：Qian Lin Directed by: Xiaomei Ling Analytical Chemistry specialty of Peking University Health Science Center This thesis is mainly to develop a novel method for the determination of plasma protein binding using capillary electrophoresis and then apply it to measure the plasma protein binding of three different drugs. This theis also contains the examination of the hepatic metabolism of two newly developed nucleoside analogue prodrugs. The work is devided into three parts: In this part, we first clarified the basic knowledge and theories of plasma protein binding, and further on gave critical and comprehensive evaluations on the methods and techniques established to determine plasma protein binging. At the same time, we described the advantages, disadvantages and the applications of different in vitro models in hepatic metabolism research. We established a novel method for the determination of plasma protein binding in rat plasma using capillary zone elec