“三基”训练检验分册351-385ppt课件.pptx

《医学临床“三基”训练》 检验分册(第四版）基础理论、知识问答（351-385）;§5.2基础理论和基本知识问答351.抗原抗体反应有何特点? 抗原抗体反应的特点是:①特异性。②按比例。③可逆性。 ; 352.抗原抗体反应可分为几个阶段? 抗原抗体反应可分为两个阶段。第一阶段为特异性结合阶段,此阶段反应快,但不出现可见反应。第二阶段为反应阶段,在各种环境因素影响下,抗原抗体进一步交联和聚集,出现肉眼可见反应,此阶段反应慢。实际上两阶段难以严格区分,若反应开始时抗原抗体浓度较大且两者比例适合,在多种因素影响下,可很快形成可见反应。 ; 353.影响抗原抗体反应有哪些因素? 影响抗原抗体反应的主要因素是电解质、酸碱度和温度。适当振荡也可促进抗原抗体分子接触,从而加速反应。 ‘ ; 354.血清学反应的应用原则???什么?试举例说明o (1)用已知抗原检测未知抗体,如诊断伤寒的肥达试验和诊断梅毒的LJSR试验。 (2)用已知抗体检测未知抗原,如用诊断血清鉴定病原微生物,用抗甲胎蛋白血清检测甲胎蛋白等。 ;355.何谓凝集反应?一般可分几种? 凝集反应是指颗粒性抗原或细胞性抗原与其相应抗体,在适量电解质和一定温度条件下,经过一定时间,出现肉眼可见凝集的现象。凝集反应可分为直接凝集反应、间接凝集反应、胶乳凝集试验、协同凝集反应、抗球蛋白试验以及病毒血凝及血凝抑制反应等。其中间接凝集反应又可分为正向间接凝集反应、反向间接凝集反应和间接凝集抑制反应。抗球蛋白试验又可分为直接试验和间接试验。 ; 356.何谓沉淀反应?沉淀反应试验可分几种? 沉淀反应是指可溶性抗原(血清蛋白质、细菌培养滤液、细菌浸出液等)与其相应抗体结合后,在适量电解质和一定温度条件下,且两者比例适合时,产生肉眼可见的沉淀物的现象。 ;常用的沉淀试验有环状沉淀试验、絮状沉淀试验和在凝胶中的沉淀试验。凝胶中的沉淀试验是指可溶性抗原与其相应抗体在凝胶中自由扩散,或在电场中扩散,在适量电解质和一定温度条件下,在抗原抗体比例适合处,形成白色沉淀线、沉淀环或沉淀峰。自由扩散有单向扩散和双向扩散试验,电场中扩散有单向电扩散(火箭电泳)和双向电扩散(对流电泳)。此外,还有免疫电泳,即琼脂平板电泳与双向扩散等。 ; 357.试述间接荧光素标记抗体技术的原理。 将含有抗原的细胞制成抗原片,加上待测血清后,其中所含的相应抗体可与细胞内或细胞表面的抗原结合,再加入标记有异硫氰酸荧光素的第二抗体(抗抗体,一般是抗人lgG)时,荧光素标记抗体又可和已与抗原结合的待测血清中的抗体反应,在荧光显微镜下,即可见到抗原部位呈现荧光,间接证实待检样品中存在某种抗体。; 358.试述酶联免疫吸附试验(ELISA)的原理。 将抗原包被于固相载体,加人待测血清,如其中含有相应抗体,可与包被抗原结合。洗去不参与反应的无关蛋白成分后,再加入酶标记的第二抗体或酶标记抗原,使与待测抗体反应,在固相载体上形成抗原一待测抗体一酶标记抗抗体或抗原一待测抗体一酶标记抗原的复合物。;待加入底物后,酶催化底物,产生呈色物质。根据着色深浅,可判定待测抗体的有无及含量。如检测lgM类抗体,可用抗弘链抗体包被固相载体,再依次加入待测血清、抗原、酶标记的针对抗原的特异抗体。如检测抗原,可采用抗原捕获(双抗体夹心)EIJSA。除此之外,EIJSA还有很多其他的衍变方法,如竞争抑制法等。 ; 359.简述抗球蛋白试验的原理。 红细胞表面包被了lgG抗体分子或补体分子C3、C。片段,但不能产生凝集现象。lg6抗体和补体都是人球蛋白,以此免疫动物,或用杂交瘤(hybri—doma)技术可以得到抗球蛋白。这类抗体的特异性是针对lgG-分子的Fc段或补体G、G的片段,可以和包被在红细胞上的抗体分子和补体分子作用,使红细胞发生凝集,抗球蛋白分子起着搭桥的作用。红细胞包被的抗体还可以是lgA或lgM,这必须用相应的抗lgA和抗lgM才能检出。 ; 抗球蛋白试验可分直接法和间接法。直接法是检测体内被抗体／补体致敏的红细胞,如自身免疫性溶血性贫血和新生儿溶血病的诊断等。间接法是检测红细胞在体外致敏的方法,亦即检测血清中有无游离的不完全抗体,可用于检测孕妇Rh抗体和鉴定Rh血型等。 ;360.什么是免疫浊度法? 免疫浊度法是抗原抗体在一种特殊缓冲液中快速形成抗原抗体复合物,反应物中呈现浊度,与一系列标准品对照,从而计算出受检物的含量。免疫浊度法现在已有免疫透射比浊测定法、免疫胶乳浊度测定法和免疫速率散射浊度比浊法。免疫浊度法较一般沉淀试验操作简单、测定时间短、敏感度高,且可以使用于自动