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单抗ppt课件
2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体
二、单克隆抗体;;“导学案”合作探究
2、制备单克隆抗体时,为什么要选用效应B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞?;小鼠的B淋巴细胞; 如何使小鼠体内产生分泌某种特定抗体的B淋巴细胞? ;实际问题2:; 如何筛选出杂交瘤细胞?;①细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基喋呤阻断。
②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。
③(选择缺陷型)鼠骨髓瘤细胞中只有D途径,没有S途径,但能不断分裂增殖。
你想到筛选杂交瘤细胞的方案了么? ;; 筛选出的杂交瘤细胞可能有几种情况?
如何筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞?;方法——
抗原-抗体杂交法; 通常采用有限稀释法,将筛选出来的杂交瘤细胞多倍稀释,接种在多孔细胞培养板上培养,使每孔细胞不多于一个,再由这些单细胞克隆生长,然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体,那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。;; 如何克隆杂交瘤细胞?;单克隆抗体;;科勒;6、单抗隆抗体的应用
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