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梅毒的实验室诊断 梅毒螺旋体 梅毒是苍白螺旋体（Treponema pallidum)(又名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性经典的性传播疾病，可引起人体多系统多脏器的损害，产生多种多样的临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命。 暗视野显微镜法直接镜检图像（×1000） 传播途径 性接触是主要的传染途径 未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染性 随着病期的延长，传染性越来越小？？ 到感染后2年，通过性接触一般无传染性？？ 母婴传播 在妊娠7周时，梅毒螺旋体即可通过胎盘传染未经治疗者，虽已无性传播（病期2年），但妊娠时仍可传染给胎儿，病期越长，传染性越小; 输血传染 梅毒的免疫性 人类对梅毒无先天免疫性，尚无疫苗接种进行人工免疫，仅能在受感染后产生感染性免疫。已完全治愈的早期梅毒患者仍可以再感染 感染梅毒后，首先产生IgM型抗梅毒螺旋体抗体，感染2周后即可测出，早期梅毒抗梅治疗3～9个月后或晚期梅毒治疗2年后，大部分病人IgM可转阴性，再感染时又出现阳性，故IgM型抗体的存在是活动性梅毒的表现 感染梅毒4周左右产生IgG型抗梅毒螺旋体抗体，即使经足量抗梅治疗，梅毒螺旋体抗原消失后很长时间，IgG抗体仍可通过记忆细胞的作用继续产生，甚至终生在血清中可测出 另一种具有抗体性质的物质叫反应素（reagin），是梅毒螺旋体破坏人体组织过程中释放出的一种抗原性心磷脂刺激机体所产生的抗体。反应素一般在感染后5～7周（或下疳出现后2～3周）产生。经正规治疗后可逐渐消失 胎儿在宫内感染梅毒螺旋体后，胚胎晚期（6～9个月）已能合成IgM型抗体，出生后第3个月开始形成IgG型抗体；IgM抗体不能通过胎盘，而IgG抗体能通过胎盘，如在患儿血清中检侧出IgM抗梅毒螺旋体抗体是诊断先天性梅毒的有力证据（但IgM阴性并不能排除先天性梅毒） 临床分期（CDC） 一期梅毒： 硬下疮（潜伏期2周一4周），腹股沟或患部近卫淋巴结肿大。 二期梅毒： 可有一期梅毒史，病期在2年以内。皮损，全身浅表淋巴结肿大， 可出现梅毒性骨关节损害、眼损害、内脏及神经系统损害等。 三期梅毒（晚期梅毒）：可有一期或二期梅毒史。病期2年以上。 晚期良性梅毒：皮肤黏膜损害，骨梅毒、眼梅毒、其他内脏梅毒。神经梅毒，心血管梅毒 隐性梅毒（早期和晚期）：无任何梅毒性的症状和体征 早期隐性梅毒：病期在2年内， 晚期隐性梅毒：病期在2年以上。 胎传梅毒（先天梅毒）：生母为梅毒患者或感染者 非特异性梅毒血清学试验 非梅毒螺旋体抗原血清试验：是以心磷脂、卵磷脂及胆固醇作为抗原检查血清中的反应素，用于初筛试验及疗效观察。可以分为以下四种试验，原理基本相同 1、性病研究实验室玻片试验（VDRL) ：试剂需现配现用，且要在显微镜下观察结果，故国内实验室很少采用。但VDRL是诊断神经性梅毒最特异的血清学方法 2、不加热血清反应素试验（USR)：试剂无需现配现用，但仍要在显微镜下观察结果，现已很少使用 3、快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR)：在特制的纸片上进行，加入一定量特制的炭粉，可使抗原抗体出现凝集，用肉眼可观察结果 4、甲苯胺红不加热试验（TRUST)：在试剂中以红色的甲苯胺红颗粒代替黑色的炭粉颗粒，使结果更易于观察 非梅毒螺旋体血清学试验结果判读 关于稀释度，滴度和效价的正确认识 稀释度（dilution）是溶液被冲淡的程度。例如，1ml 血清加179ml 的生理盐水， 则稀释度为1：180。 滴度（titer）是稀释度的倒数。例如上例中的1 ：180 的稀释度，其滴度就是180。效价是滴度的同义词。效价即滴度，两者通用。当前虽然专业的化学和免疫学词典和专著中对这些词的使用已规范化， 但在不少书刊的文章中常见误用， 如称效价1： 40 之类。 RPR滴度操作步骤 RPR凝集图像 临床意义 对一期梅毒的敏感性为74%～87%，二期梅毒达100%，三期梅毒34% ～ 94%。特异性96% ～ 99%。 适用于各期梅毒的诊断。早期梅毒经治疗后血清滴度可下降或转阴，故可用于疗效观察、判愈、判定复发或再感染。 VDRL试验适用于神经梅毒的脑脊液检查，特异性高，但敏感性低。 早期梅毒（一期、二期）经足量规则抗梅毒治疗后3个月，VDRL试验抗体滴度下降2个稀释度，6个月下降4个稀释度。 一期梅毒1年后转为阴性 二期梅毒2年后转为阴性。 晚期梅毒治疗后血清滴度下降缓慢，2年后约50%病人血清反应仍为阳性。 假阳性问题 技术性假阳性 由于标本的保存不当（如细胞污染或溶血）、试剂质量差或过期、或实验室操作错误所造成。 生物学假阳性 (biological false-positive ,BFP) 是由于患者有其他疾病或生理状态发生变化，使梅毒