药物分析13第十三篇 章 生化药物分析 .ppt

药物分析中国药科大学药物分析教研室 * * 第13章 生物药物分析概论 本章主要内容 生物药物种类与特点 生物药物质量检验的基本程序与方法 生物药物理化测定法：HPLC法、酶法、电泳法 生化药物 生物制品 （生物技术药物） 生物药物（biopharmaceuticals）：利用生物体、生物组织和器官制得的天然活性物质及其类似物 一、概述 分类没有严格的界限 动植物及微生物提取、分离的天然生物活性物质及半合成得到生命基本物质及其衍生物等 生化药物biochemical drugs 人纤维蛋白原 凝血酶、胰蛋白酶 肝素、玻璃酸 氨基酸、Pr类 酶、辅酶类 多糖类 脂类 核酸类 应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞及各种动物和人源的组织和液体等生物材料制备的药品 自动免疫制品 生物制品biological products 其他（血液制品、组织制品等） 免疫血清 菌苗、疫苗、类毒素 诊断制品 基因工程药物主要类别 蛋白质多肽类： 激素类及神经递质类 细胞因子类 酶及凝血因子类 核酸类： 反义寡核苷酸 等 人生长激素释放抑制因子（Human Somatotin） 干扰素（Human Interferons） 链激酶（Streptokinase） 5. 生化药物和基因工程药物特点 1）共同特点：活性强，毒副作用小 2）分子量大，结构确证难 3）全过程的质量控制：从原料、菌种到生产设备、中间体、产品 4）生物活性检查 5）安全性检查：异常毒性检查、过敏物质检查、外源性DNA残留量、宿主菌蛋白残留量等 6）效价（含量）测定 收录于《中国药典》和《中国生物制品规程》 二、检验的程序和方法 鉴别 杂质检查 安全性检查 含量（效价）测定 1.鉴别 1）理化鉴别法：UV、肽图等 反应序列信息 RP-HPLC法分析重组人胰高血糖素类多肽－1（7－36）肽图谱 《药物分析杂志》2005，25(1)24-26 标准品 样品 胰蛋白酶酶解 V8蛋白酶酶解 rhGLP-1(7-36)由30个氨基酸组成，结构中含2Lys、1Arg、1Asp、3Glu 2）生化鉴别法：免疫法、酶法、电泳法等 3）生物鉴别法：动物试验等 专属性强，应用广泛 免疫双扩散法 SDSMarker Sample 116.0k 66.2k 45.0k 35.0k 25.0k 18.4k 14.4k 2. 杂质检查 1）一般杂质：氯化物、重金属、水分等 2）特殊杂质：有关物质等 高效凝胶过滤色谱法(High Performance Gel Filter ，HPGFC）、RP-HPLC 萄聚糖凝胶 立体网状结构图 标准蛋白色谱图 时间(min) 0 4 8 12 1 6 5 4 3 2 1.右旋糖酐蓝 2.醛缩酶 3.血清白蛋白 4.碳酸酐酶 5.抑蛋白酶肽 6.酪氨酸 重组人肿瘤坏死因子相关调亡诱导配体（rhTRAIL）质控方法和质量标准的研究 《药物分析杂志》2005，25（3）253-257 Synmetry 300 C18柱（3.9×150mm） 3. 安全性检查 1）热原检查 家兔法、鲎试剂法 2）降压物质检查 3）过敏试验 4）异常毒性试验 豚鼠、大鼠存活试验 5）无菌试验 6）宿主细胞蛋白残留、DNA残留 ELISA法 *