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蛋品科学课件11.精深加工教材课程.ppt
氯化钠溶液提取卵黄高磷蛋白 蛋黄用乙醇萃取卵磷脂和胆固醇后,再用氯化钠溶液提取卵黄高磷蛋白。 氯化钠溶液浓度:1.75mol/L 氯化钠溶液用量: 8倍 卵黄高磷蛋白得率: 1.14% 卵黄高磷蛋白的N/P摩尔比: 7.9 四、卵白蛋白 1.盐析法 卵白蛋白可以用硫酸铵和硫酸钠盐析得到针状结晶。这里主要介绍半饱和硫酸铵法提取卵白蛋白。该方法的流程如下:蛋清一份,饱和硫酸铵一份,混合离心,上清以0.5M H2SO4调pH至卵白蛋白的等电点,并以卵白蛋白引导结晶,静置过夜,离心分离出的沉淀即为卵白蛋白。 此种方法得到的卵白蛋白中含有大量的硫酸铵,需用透析、超滤等方法脱盐后才能得到纯净的卵白蛋白。 蛋清提取溶菌酶后,再用饱和硫酸铵盐析法分离卵白蛋白。 提取工艺为:饱和硫酸铵溶液和等质量蛋清混合盐析后离心,上清用0.5M H2SO4调节pH至4.3,静置过夜,离心后去上清,将沉淀溶解,超滤脱盐,得卵白蛋白。 卵白蛋白的得率: 4.32% ,提取率: 80% 2.色谱法 用离子交换色谱法分离出了卵白蛋白,先除去蛋清中的卵黏蛋白,然后用阳离子交换剂(S Hyper DF)分离出溶菌酶和卵转铁蛋白,分离出这两种蛋白质后的副产物再用阴离子交换剂(Q Sepharose FF)分离出卵白蛋白。此种方法得到的卵白蛋白纯度达91%。 用高速逆流双水相色谱法从鸡蛋清中分离出卵白蛋白,其电泳纯度为100%,收率为95%。 3.电泳法 电泳分离蛋清中的蛋白质主要依据其不同的等电点和分子量。 用SDS和双向凝胶电泳分离鸡蛋蛋白质,双向电泳包括等电聚焦电泳和SDS,等电聚焦电泳根据蛋白质的等电点进行分离,SDS依据的是蛋白质不同的分子量。 4.超滤法 采用搅拌式超滤装置。该方法分为两个阶段,第一阶段是将溶菌酶和卵白蛋白与蛋清的其他成分分离,70 kDa PVDF膜的截留效果最好; 第二阶段用30 kDa PES膜把这两种蛋白质分离,这种方法的关键在于超滤膜的选择以及操作情况。 五、胆固醇 胆固醇广泛存在于动物体内,尤以脑及神经组织中最为丰富,在肾、脾、皮肤、肝、胆汁及蛋黄和鱼子中含量也很高。 胆固醇是动物组织细胞所不可缺少的重要物质,它不仅参与形成细胞膜,而且是合成胆汁酸,维生素D以及甾体激素的原料。 胆固醇也是日用化工、医药、液晶工业等的重要原料,已被广泛应用于合成维生素D3、胆固醇酯、胆甾相液晶、脂质体,人工牛黄,化妆品,乳化剂,激素类药物原料和对虾饲料添加剂等各个方面。 胆固醇结构中含有多个手性碳,目前未有合成方法的文献报道,主要由天然物中提取制备。 1.超临界CO2流体萃取法 超临界CO2在蛋黄粉胆固醇脱除中,最佳脱除参数是萃取温度为40℃ ,CO2流量为3kg/h,萃取压力为30MPa,胆固醇脱除量随萃取时间的增长而显著增加。 由于胆固醇是弱极性分子,CO2进行萃取时压力要求比较高,在较低压力下,超临界CO2对胆固醇的脱除作用比较弱, 即使延长时间,其脱除效果也不是很理想。 蛋黄油中胆固醇在超临界乙烷中有很好的溶解性,比在超临界CO2中的溶解性还要好。 2.蒸馏方法 蒸馏法是利用胆固醇在一定条件下能被蒸发的特性进行的,常见的方法有蒸汽提馏和分子蒸馏。 蒸汽提馏法是在0.000 13~0.0009MPa压力下,通入逆流蒸汽,加热至220-290℃,处理5min可脱除93%的胆固醇。 分子蒸馏法是在0.01MPa压力下,温度为190~210℃, 胆固醇的脱除率可达90%。 3.乳化液抽提法 乳化液抽提法就是利用胆固醇的两亲表面活性而进行的。用含单甘酯的食用油抽提鸡蛋中的胆固醇,就可脱除部分胆固醇。 4.结晶法 结晶法是指胆固醇从均匀相中形成固体颗粒并从溶液中以晶体形式析出的过程。生产中常采用搅拌或其他方法使形成的晶粒悬浮在母液中,以促进结晶过程。但结晶法需要多次重复操作,而且脱除效果也不理想。 5.吸附法 吸附法脱除胆固醇常用的吸附剂有活性炭、活性白土以及一些特定的化学吸附剂。利用活性炭做吸附剂,可脱除90%以上的胆固醇,利用特定的化学吸附剂可使胆固醇的脱除率更高。用羧化聚苯乙烯与二乙烯基苯的共聚物作为吸附剂,键合到番茄碱糖苷上,用吸附剂进行食物的胆固醇脱除,可以全部去除胆固醇。 6.β-环糊精包埋法 β-CD能与胆固醇发生包结反应,形成既不溶于水也不溶于油脂的包结物,将该包结物分离即可脱除原料中的胆固醇。 蛋黄经20 MPa均质,添加质量分数为8%β-CD,经35℃混合10min,4000 r/min离心10 min,胆固醇的去除率能够达到85%,此时β-CD的残留率为14.3%。 7.丙酮提取 鸭蛋黄粉 丙酮提取 提取液水浴加热浓缩 浓缩物加乙醇加热回流除杂 滤液冷却结晶得粗胆固醇酯
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