rphplc法测定双黄连制剂中黄芩苷含量及其药物动力学研究-determination of baicalin in shuanghuanglian preparation and its pharmacokinetics by rp hplc.docx
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rphplc法测定双黄连制剂中黄芩苷含量及其药物动力学研究-determination of baicalin in shuanghuanglian preparation and its pharmacokinetics by rp hplc
中文精要RP-HPLC法测定双黄连制剂中黄苓普含量及其药物动力学研究摘要1RP..HPLC法测定双黄连制剂中黄苓音含量目的z采用反相高效液相色谱法测定双黄连口服液、注射液中黄苓苦的含量-方法:(1)色谱条件z选择合适的固定相,调整流动相的组成、配比、流速以使黄苓音色谱蜂分离完全。(2)色谱系统适用性试验:在确定的色谱条件下考察黄苓音色谱峰的分离度、理论板数、对称度等是否符合测定要求。(3)标准曲线的制备=配制一系列浓度的黄苓背对照品溶液?迸样测定,以黄苓背对照品溶液的浓度为横坐标,相应的峰面积为纵坐标绘制标准曲线o(4)最低检测限试验:逐步稀释黄苓背对照品溶液,进样,直至黄苓音色谱峰的峰高为噪声三倍时即为最低检测浓度。(5)样品稳定性试验2取供试品溶液分别放置O2,4,6,8,10,12小时后,按己确定的色谱条件测定峰面积(6)样品精密度试验:取双黄连口服液,分别制备供试品溶液,按上述方法进样,重复测定5次。(7)祥品重现性试验:取同一双黄连口服液5份,制备供试品溶液后,进样,测定黄苓苦的含量。(8)回收率试验:依次取双黄连口服液适量,分别加入黄苓背对照品溶液,进样,测定黄苓营的含量D(9)样品含量测定:分别取双黄连口服液、双黄连注射液,制备供试晶溶液,进样,按外标法计算黄苓中文摘要昔的含量。结果:(1)最佳色谱条件:以C18色谱柱为固定相,以甲醇-2%磷酸(65:35)为流动相,检测波长为278nm,流速为1.Onù.min-1,柱温为2SGC,灵敏度:O.5AUFS.进样量∞为20μ10(2)色谱系统适用性试验z在上述色谱条件下,黄苓昔峰形良好,无杂质峰干扰,其理论塔板数大于50,不对称因子为1.08-1.16,保留时间为3伽m左右,与相邻色谱峰的分离度均大于2.00(3)标准曲线的绘制z黄苓昔浓度在0.8μgmL-1-3.2μg.mL-1范围内与蜂面积有良好的线性关系,回归方程为Y=807363X+212583,相关系数r=0.9锦9(n=7)o(4)最低检测限z最低检测浓度为2.56ng.mI.,-lo(5)样品稳定性试验z样品溶液在12小时内稳定o(6)样品精密度试验E重复进样5次后,峰面积的RSD为0.29%,(7)样品重现性试验E黄苓昔含量的相对标准偏差为0.96%0重现良好,他〉回收率试验:样品的平均回收率为98.73%。RSD为0.44%0(9)含量测定结果:双黄连口服液中黄苓苦的量为130.lmg.l仇地-1,双黄连注射液量为79.1Qmg10mL-1结论=本文建立了HPLC法测定制剂中黄苓苦的含量,灵敏度寓,选择性强,简便快速,可用于双黄连口服液和双黄连注射液的质量控制。关键词:RP-HPLC,黄苓昔,含量测定2中文摘要2双黄连制剂中黄苓背药物动力学研究目的:研究双黄连中黄苓管在动物体内药物动力学特征,以比较黄苓昔吸收、分布、消除的差异。方法:(1)试验动物:SD大鼠,体重约250g,雌雄各半。(2)血药浓度测定方法:采用RP翩HPLC测定血浆样品中黄苓苦的浓度自。〉色谱条件的确定:选择固定相,并对流动相的组成、配比、流速等因素进行分析,确定色谱条件。(4)血浆样品的预处理:取大鼠血浆,置具塞离心管中,加三倍量甲醇沉淀蛋白,涡流混悬振荡308,离心5min(10制r-mL.勺,吸取上清液,过滤,取滤液,注入色谱仪,以峰面积外标法进行定量。(5)方法的选择性z取黄苓背对照品溶液、血浆样品的预处理项下的大鼠空白血浆的色谱图、双黄连口服液提取液动物体内的血浆样品色谱图、双黄连注射液提取液动物体内的血浆样品图F按照已确定的色谱条件注入色谱仪,记录色谱图1)(6)标准曲线的制备:取大鼠空白血浆0.2时,加入不同浓度的黄苓背对照品的甲醇溶液,混匀,按血浆样品的预处理项下同法操作,记录黄苓苦的峰面积o(7)最低检测限试验:以信噪比SIN3时相应的黄苓苦的浓度定为最低检测浓度。(8)回收率试验:取大鼠空白血浆,加入不同浓度的标准黄苓营的甲醇溶液,每个浓度5份。按血浆样品的预处理项下方法记录黄苓苦的峰面积e(9)精密度试验:取大鼠空白血浆,加入不同浓度的黄苓营对照品的甲醇溶液,每个浓度5份,进行含量测定,计算样品的日内精密度1另配制上述3个浓度的溶液5份,分别于不向日进行测定,于一周内完成,计算样品的日间精密度。(10)稳定性试验:取按血浆样品的预处理3中文精要。项下方法处理好的样品,分别放置。,2,4f6,8,10,12h,进样,测定峰面积o(11)药代动力学实验2取大鼠乙酶麻醉后以背式法固定,从锁骨中点向上O.5cm处开始将皮肤纵向剪开约1.5cm,分离出右颈外动脉。取医用硅胶管(内径.51mm,外径0.9m),用丝线结扎颈外动脉的头端,将硅胶管于锁骨上约lcm处向心插入该动脉2.S-3cm,从导管推注生理盐水2mlo
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