satb1增强胃癌细胞多重化疗耐药和侵袭能力的分析-analysis of satb 1 enhancing multidrug resistance and invasiveness in gastric cancer cells.docx

华中科技大学硕士毕业论文目录缩略词表1中文摘要2Abstract3正文前言4材料和方法6结果24讨论33参考文献37致谢40附录42华中科技大学硕士毕业论文缩略词表英文简写英文全称中文全称SATB1SpecialAT-richsequence-核基质结合蛋白bindingprotein1MDRRT-PCRMultidrugresistantRealtime-polymerase-多重耐药实时聚合酶链式反应chainreactionVCRVincristine长春新碱FBSFetalbovineserum胎牛血清SDSSulfatesodiumsalt-Polyacrylamidegel-硫酸聚丙烯酰胺凝胶电泳ElectrophoresisMTT3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-四甲基偶氮唑2,5-diphenyl-tetrazoliumbromideAssayPBSPhosphatesalinebuffer磷酸盐缓冲液p-gpp-glycoproteinp-糖蛋白SiRNASmallinterferenceRNA小干扰RNAPIpropidiumiodide碘化丙啶FACSFluorescenceActivating-CellSorter荧光激活流式细胞分离术华中科技大学硕士毕业论文目的:探讨SATB1在胃癌细胞的化疗耐药及侵袭中的作用。方法：选用人侵袭性胃癌细胞系SGC7901及其耐长春新碱的耐药株SGC7901/VCR作为研究对象。利用小干扰RNA片段和含有目的基因的质粒分别转染以上两种细胞系，建立各自的高表达和低表达细胞模型，然后利用以下方法进行实验。(1)利用RT-PCR和westernblotting技术分别从RNA水平和蛋白质水平测试目的基因SATB1在SGC7901细胞及其各种变异细胞系中的表达差异。(2)利用体外药敏实验，测试SATB1的不同表达体对药物敏感性的差异,以此证明胃癌细胞的多重化疗耐药和SATB1之间的关系。(3)利用SATB1不同表达水平的细胞株分别进行Transwell实验，测试细胞的侵袭能力，以探讨SATB1能否增强胃癌细胞的侵袭能力。（4）利用流式细胞仪对各表达水平的细胞进行凋亡测试和胞内药物蓄积分析，探究SATB1增强胃癌细化疗耐药及侵袭能力的有关机制。结果：SATB1可通过抑制药物蓄积和降低细胞的凋亡来增强胃癌细胞的化疗耐药能力，并可促进胃癌细胞的侵袭能力。结论：SATB1在胃癌的化疗耐药及其侵袭转移中扮演着重要角色，未来可能成为逆转化疗耐药的新的作用靶点。关键词：胃癌；SATB1；多重化疗耐药；侵袭华中科技大学硕士毕业论文RegulationofmultidrugresistanceandinvasivegrowthbySATB1inhumangastriccancercellsAbstractObjective:PecialAT-richsequencebindingprotein1(SATB1)isanuclearfactorthatfunctionsastheglobalchromatinorganizertoregulategeneexpression.RecentevidencesuggestedtheoncogenicroleofSATB1inbreastcancer.However,theroleofSATB1ingastriccancer,especiallythemalignantphenotypessuchasmulti-drugresistance(MDR)andmetastasisremainspoorlyunderstood.Methods:InthisstudyweusedaggressivehumangastriccancercelllineSGC7901anditscorrespondingmulti-drugresistantvariantSGC7901/VCRcellsasthemodel.RT-PCRandWesternblotanalysisshowedthatSATB1washighlyupregulatedinSGC7901/VCRcells.InvitrodrugsensitivityassaydemonstratedapositivecorrelationbetweenSATB1expressionlevelanddrugresistance.Results:GainandlossofSATB1experimentsfurtherdemonstratedthatSATB1contributestoMDRbyinhibitingtheaccumulationofVCRingastriccancercellsandpr