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图10 醛复红与偶氮焰红染色,肥大细胞和弹性纤维 图11 含标本的树脂块(1)和玻璃刀(2) 1 2 ↓ ↓ 图12 超薄切片机 1树脂块 2切片刀 ←1 ↑2 图13 超薄切片捞在铜网上,电子染色(醋酸铀、柠檬酸铅)后固定于电镜的标本支持架内 ↑ ↓ 图14 电子显微镜 1标本支持架插入部位 2观察窗 ↓1 ↑2 图15 透射电镜图,浆细胞 图16 扫描电镜图,血细胞 图17 PAS反应,小肠上皮杯状细胞的黏原颗粒 图18 免疫组织化学原理模式图 图19 免疫组织化学(荧光素标记) 毛细血管内皮细胞呈vWF阳性 图20 免疫组织化学(辣根过氧化物酶标记) 胰岛B细胞呈胰岛素阳性 图21 免疫组织化学电镜图示上皮细胞膜MAM-6蛋白 (A 胶体金标记 B 辣根过氧化物酶标记) 图22 原位杂交 主动脉平滑肌细胞呈弹性蛋白mRNA阳性 图23 计算机三维重建 示胰腺部分结构 动脉(红色)、静脉(蓝色) 导管(黄色)、胰岛(紫色) 图24 体外培养的HeLa细胞相差显微镜图 图25 体外培养的平滑肌细胞 (免疫组织化学染色显示肌动蛋白) 图26 实验中的组织工程耳 组织学与胚胎学 组织学绪论 Introduction of Histology 主编:邹仲之 组织学(histology) 研究机体微细结构及其相关功能的科学 研究水平:组织、细胞、亚细胞和分子 (例:心脏) 研究内容 发展简史 学习方法 技术简介 组织学 组织 意义 图1-3 组织(tissue) 构成:细胞群和细胞外基质 细胞:机体结构和功能的基本单位,成人约有1015 个、200 余种 细胞外基质:由细胞分泌形成 类型:上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织 组织以不同的种类、数量和方式组合形成器官;若干功能相关的器官构成系统 研究内容 发展简史 学习方法 技术简介 组织学 组织 意义 促进了生理学的进步 是病理学的基础 促进人类对自身的深入了解 研究内容 发展简史 学习方法 技术简介 组织学 组织 意义 简称光镜(light microscope,LM) 16 世纪末荷兰人发明→1665 年胡克命名“细胞” →马尔比基观察了脾、肺、肾、表皮;列文虎克发现红细胞、精子、肌纤维;格拉夫发现卵泡→1801 年比沙提出“组织”概念 光学显微镜 细胞学说 电子显微镜 当代组织学 研究内容 发展简史 学习方法 技术简介 提出:施万、施莱登(1838、1839) 内容:细胞是一切动、植物体的基本结构和功能单位;细胞内进行着复杂的化学反应;新细胞由原有细胞产生 光学显微镜 细胞学说 电子显微镜 当代组织学 研究内容 发展简史 学习方法 技术简介 简称电镜(electron microscope, EM) 发明:1932 年 卢斯卡、科诺尔,使分辨率提高到 0.2nm 超薄切片术(50~80nm) 超微结构(ultrastructure):即细胞膜、细胞器、染色体等亚细胞结构 光学显微镜 电子显微镜 当代组织学 研究内容 发展简史 学习方法 技术简介 细胞学说 新仪器、新技术的发明和应用 免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学引入分子水平 组织工程学技术拓展了组织学的临床应用前景 光学显微镜 电子显微镜 当代组织学 研究内容 发展简史 学习方法 技术简介 细胞学说 审视角度 组织水平:层次顺序、特征性结构和细胞 细胞水平:主要细胞的分布、结构特点(含重要细胞的超微结构)及功能 形态和结构相统一 结构是功能的基础,功能是结构的必然表现 培养观察能力:重视实习课和图像观察 培养空间思维能力:将二维图形还原为三维构像 研究内容 发展简史 学习方法 技术简介 石蜡切片术(paraffin sectioning):取材、固定、脱水、包埋、切片(5 ~ 10 μm 厚)、染色 苏木精- 伊红染色法(hematoxylin-eosin staining, HE染色法):苏木精为碱性染料,使染色质和核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,使胞质和细胞外基质着红色 嗜酸性(acidophilia);嗜碱性(basophilia) 特殊染色 光镜技术 电镜技术 组织化学 图像分析 研究内容 发展简史 学习方法 技术简介 图9、10 细胞培养 组织工程 图4-8 透射电镜术(transmission electron microscopy, TEM) 用于观察组织细胞的超微结构 戊二醛、锇酸双重固定→树脂包埋→超薄切片(50 -80nm 厚)→电子染色(醋酸铀、柠檬酸铅) 根据电子束在不同结构上被散射程度的差异
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