内毒素与真菌葡聚糖检测的临床意义ppt课件.ppt

真菌(1-3)- β-D-葡聚糖结果判断 二、真菌(1-3)-β-D-葡聚糖的临床应用 细菌内毒素测定试剂盒（动态浊度法）的临床应用 1、假阳性因素： 污染：操作环境及操作过程中污染，可能造成假阳性； 药物：应用某些抗生素如β-酰胺内酯类、氨基糖苷类和喹诺酮类等患者； 多糖：葡聚糖（10pg,Tn1）能激活试剂旁路（G途径），当葡聚糖含量过高，处理液不能全部处理时，常规的内毒素实验也呈阳性； 蛋白质：阳离子蛋白如溶菌酶、核糖核酸酶A及人免疫球蛋白G均能与内毒素形成细菌内毒素——蛋白复合体，对细菌内毒素有显著的屏蔽作用而影响测定细菌内毒素的结果。此外，血红蛋白与LPS结合可改变LPS的一些物理特性，从而增加LPS的生物学活性及LPS与LAL的作用。人血红蛋白、球蛋白、抗凝血酶Ⅲ均可以造成假阳性结果。 2、假阴性因素： 离子：离子对内毒素测定结果影响很大。一方面，高浓度的离子会引起内毒素的聚集，使内毒素不易解聚；另一方面，试剂中的C因子必须在二价阳离子的参与下才能被激活形成活化C因子，当溶液中存在维生素、添加剂、右旋糖酐-40、抗凝血剂时，可能干扰试剂形成凝胶。 1、假阳性因素（G试验）： 污染（故试验应采用无热原试管、枪头和蒸馏水等）； 利用纤维膜进行血液透析患者； 纱布或其他医疗物品（外科手术）中含有葡聚糖； 某些品牌的静脉制剂（白蛋白、凝血因子、免疫球蛋白）； 某些细菌败血症患者（尤其是链球菌败血症）； 某些疾病导致病人自身丙种球蛋白增高； 使用多糖类抗癌药物、放化疗造成的粘膜损伤导致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌经胃肠道进入血液等也可能造成假阳性。 2、假阴性因素（G试验）： 隐球菌、接合菌感染的患者 使用某些抗真菌药物（卡泊芬净：可非竞争性抑制1-3-β-D葡聚糖的合成） 标本放置时间过长 真菌(1-3)- β-D-葡聚糖测定试剂盒（动态浊度法）的临床应用 采集注意事项 采样过程要求无菌操作 常规病人早上用药治疗前空腹采血 标本类型：抗凝静脉血 使用无热原真空采血管 采集血液2-3ml并立即混匀 采血后半小时内送检 如不能及时送检，置于4℃保存48小时 细菌内毒素真菌葡聚糖临床应用 介 绍 内 容 细菌内毒素 真菌(1-3)-β-D-葡聚糖 血液感染的特点： 主要是由革兰阳性球菌、革兰阴性杆菌和真菌的入侵导致的感染； 感染发生率高，病原菌由外源性转向内源性，条件致病菌增多，多重耐药和泛耐药菌增多； 发病急，病死率高，发病率从1986年的1.6%增至2006年的3.1%，年度增长率为0.1%，病死率达21.0%~48.0%； 从SIRS（全身炎症反应综合征）→sepsis（脓毒症）→severe sepsis→MODS（多器官功能障碍综合症）→MOF（多器官功能衰竭）是一个连续，进行性发展的动态变化过程。 一、细菌内毒素的临床应用 1、细菌内毒素：是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的一个特有成分，是一种脂多糖（Lipopolysaccharides LPS）和微量蛋白（Protein）的复合物。 大肠杆菌（Escherichia coli） 沙门氏菌（Salmonella） 志贺氏杆菌 （Shigella） 铜绿假单胞菌（Pseudomonas） 奈瑟氏球菌属 （Neisseria） 流感嗜血杆菌 （Haemophilus influenzae） 百日咳博德特氏菌（Bordetella pertussis） 霍乱弧菌（Vibrio cholerae） 一、基本概念——细菌内毒素 在医院灭菌制剂检验中应用； 对注射器、输液器等医疗器械的内毒素检测； 在透析站和血站中的应用； 在临床医学研究中的应用 内毒素检测在医院中的应用 一、细菌内毒素的临床应用 脓毒症临床特点 病原学：革兰氏阴性杆菌最常见，革兰氏阳性菌病情凶猛，真菌死亡率最高。 过度炎症反应，符合SIRS临床表现。 二高一低：高代谢状态，氧供需失平衡，糖代谢紊乱，蛋白分解增加，呈负氮平衡；高动力循环状态(高排低阻)。脏器低灌注、低氧血症。 常导致顽固性休克，是MODS/MOF的主要病因。 一、细菌内毒素的临床应用 （ 2001年，由五个学术团体在美国华盛顿联合召开了国际脓毒症会议） 希望达到的目标 Predisposition 素因 炎症反应成分的基因多态性(Toll样受体、TNF、IL-1、CD14)，提高对病原与疾病间特异反应的了解。 Infection/insult 感染 检测微生物产物(脂多糖、细菌DNA等)。 Response 反应 非特异性的活化炎症标识物(PCT、IL-6)；治疗靶目标检测(特异性介质)。 Organ dysfunction 器官功能障碍 动态检测机体细胞对损伤的反应(细胞凋亡、