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分子生物学技术28763ppt课件
分子生物学技术的原理及应用 The Popular Technology in Molecular Biology: Principle and Application 一、分子杂交与印迹技术 Molecular Hybridization Blotting Technology （一）分子杂交 斑点杂交：dot blotting DNA array DNA chips 蛋白质芯片 原位杂交：细胞原位杂交 组织原位杂交 二、聚 合 酶 链 反 应 Polymerase Chain Reaction （五）几种重要的PCR衍生技术 1. 反转录PCR技术 2. 原位PCR技术 3. 实时PCR技术 三、核 酸 序 列 分 析 Nucleic Acid Sequence Analysis 基本步骤 将DNA的末端之一标记上放射性同位素（32P） 再对DNA样品分别进行多组具碱基特异的、随机的不完全的化学修饰 在修饰碱基位置化学法断开DNA链 通过具有可分辨长短仅一个核苷酸之差的PAGE电泳，将DNA断裂片段按分子大小分开 根据放射自显影胶片上显示的末端标记片段的分布情况，直接读出DNA的核苷酸序列。 5 HO-GATCGGACCT 3 ′ ↓ 标记 5 ’32P-GATCGGACCT 3′ ↓ 不完全修饰 修饰G 修饰G和A 修饰T和C 修饰C ↓ 化学裂解 ↓ 电泳分离 —G— —G+A— —T+C— —C— 全长核酸 —— —— —— —— —— —— —— —— —— —— —— —— —— —— —— —— 四、基 因 文 库 Gene Library 五、遗传修饰动物模型的建立及应用 核转移技术—克隆动物 即动物整体克隆技术，将动物体细胞核全部导入另一个体的去胞核的受精卵内，使之发育成个体，即克隆(clone)。 DNA自动测序结果举例 目 录 基因组DNA文库 (genomic DNA library) cDNA文库 (cDNA library) 基因文库 (gene library) 是指一个包含了某一生物体全部DNA序列的克隆群体。 基因组DNA文
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