物结构确证研究的技术要求与案例分析.ppt

* * 碳谱注意点： 1. 碳信号数目比实际的少，原因可能为信号重叠，或有些季碳信号弱，或隐藏在溶剂信号内； 2. 碳信号数目比实际的多，原因可能是某些化合物存在构象异构。 分子式：C44H69NO12.H2O 结构式为C44H69NO12，在其13C全去偶谱中应显示44个峰，但实际显示多达83个峰，这是因为在溶剂中有两种构像,一种为优势一种为劣势，（文献报道在氯仿中比例为3:1） 6. 质谱(MS) ①基本原理： 将气体分子经电子流轰击,使分子中的电子成为带正电荷的分子离子,而后裂解成一系列的碎片离子,再通过磁场使不同质荷比的正离子分离并记录其相对强度,画出质谱图。 ②主要应用： 提供分子离子峰、碎片峰、丰度等信息，可以确定分子量、分子式以及推测部分结构单元。 对含有同位素元素(如Cl、Br等)的药物,利用同位素簇的丰度比，可推断药物中部分元素的种类、数量，乃至分子式、裂解方式等。 ③技术要求: a. 应尽量设法获得化合物分子离子峰。当用EI法不能出现分子离子峰时，可试用其它电离源，如CI，FAB，FI，FD，ESI等。 b. 所获数据按规定列表，并对重要的碎片离子峰的产生进行解释，提供离子裂解图。 c. 高分辨质谱不能反映药品的纯度和结晶水，结晶溶剂，残留溶剂的情况。 ④ 资料撰写格式 仪器 测试条件 数据表 裂解图 解析 M/ Z 相对丰度 碎片离子 7. 热分析 ①基本原理： 采用程序控温下，精确记录待测物质理化性质与温度的关系，研究其受热过程中晶型转变、熔融、升华等物理变化和脱水、热分解、氧化、还原等化学变化。 ②主要应用： 差示扫描量热法（DSC): 测定熔点、结晶水/结晶溶剂、考察晶型等。 热重法（TGA): 测定结晶水、吸附水和结晶溶剂、分解温度等。 ③技术要求： a. 应说明使用仪器型号、参数设定值，包括升温度速度、样品重量、温度范围。 b. 供试品与对照品应在同一仪器、相同条件下测定。 c. 差热分析曲线表达：纵坐标为热流率（dp/dt），横坐标为温度（℃）。气体一般为氮气，流速为40ml/min。 热重分析曲线表达：纵坐标为重量（mg）或重量百分数，横坐标为温度（℃），气体一般为氮气，流速为40ml/min。 ④ 资料撰写格式 仪器 测试条件 测试结果和讨论 8.X－射线衍射 粉末X-射线衍射 主要应用: a. 固体状态下单一化合物的鉴别 b. 晶型确定 c. 晶态与非晶态物质的判断等 单晶X－射线衍射 ① 主要应用: a. 化合物的骨架结构信息 b. 化合物的相对或绝对构型 c. 构象及差向异构 d. 盐键及配位键 f. 结晶水/溶剂 ②资料撰写格式 仪器 测试条件 结构解析 晶体学参数 结构测定方法 结构数据 结构图 结论 9. 综合解析 在结构确证申报资料中存在的问题主要体现在解析不充分,未对各项研究提供的数据和信息进行有机、深入、合理地综合分析,仅是机械式地罗列测试数据和图谱,没有综合解析过程,割裂了各种测试数据的联系,以致未达到对药物结构进行准确认识的目的,特别是在药物结构中的某些信息需多种方法相互结合才能作出准确判断或多种方法相互结合方可进一步深入了解药物结构信息的情况下,该现象表现得尤为明显。 ① 综合解析的一般过程: a. 确定化合物的分子式 元素分析 质谱法（尤其是高分辨质谱） 综合各种谱图提供的碳、氢等原子数 b. 根据分子式计算不饱和度 c. 确定分子中存在的主要官能团和结构单元 d. 明确各官能团、结构单元的连接方式 e. 对构型、晶型、结晶水/结晶溶剂进行分析 ② 技术要求： a. 有对照品 样品和对照品的测试结果是否一致 波谱信号的归属 b. 无对照品 详细的解析、正确的归属 参考文献可以作为重要的参