物证检验PPT课件.ppt

DNA分析技术在法医物证学上的应用 法医物证学内容 亲权关系鉴定 亲权纠纷（离婚案） 移民案 强奸致孕案 拐卖丢失儿童案 （医院中）婴儿错抱案 （计划生育中）超生与否的鉴定 个体识别 法医物证学鉴定方法 血清学方法的局限性 检材需要量大，且对时限要求较高 （HLA分型要求采血后16--24小时内必须检验） 不适用于陈旧、微量检材 鉴别能力有限，不宜用于同一认定 DNA检验 DNA 基因组DNA:核DNA与线粒体DNA 基因组 稳定的体系 人类基因组是一个十分稳定的体系： 不同的民族、群体和个体都有46条染色体 有相同数目的基因 有基本相同的核苷酸序列 正是基因组结构的这种稳定性保证了人类作为一个物种的共同性和稳定性。 基因组 变异的体系 人类基因组又是一个变异的体系。在长期进化的过程中，基因组的DNA序列不断地发生变异。 这些变异可能是有害的、有益的或中性的。 其中一些变异得以遗传，导致了不同种族、群体和个体间基因组的差异或多态性。 除了同卵双生子外，没有两个个体的基因组完全相同。 单倍型图谱计划 HapMap计划：找出约50万个标签SNPs，提供与1000万个 SNPs大致相同的图谱信息。 HapMap计划:由日本、英国、加拿大、中国、尼日利亚和美国的科学家们合作完成。2002年10月正式启动,历时三年。 2003年，中国承担了“HapMap 计划”10% 的任务。 HapMap“中国卷”的具体内容: 构建人3号、21号染色体和8号染色体短臂的HapMap; 提供一半的亚洲样品。 法医学DNA检测技术的发展 第一代： VNTR（小卫星）检测 （DNA指纹技术） 第二代： STR （微卫星）检测、线粒体DNA检测 （PCR技术） 第三代： SNP（单核苷酸多态性）检测 第一代： VNTR（小卫星）检测 （DNA指纹技术，RFLP） （20世纪80年代） RFLP技术DNA指纹技术的发明者----Jeffreys,遗传学家,1985年 DNA指纹 DNA纹印 DNA指纹技术应用的实例 DNA应用于亲权鉴定的第一个案例---- 用DNA指纹技术进行一例移民案件的亲权鉴定，使得一名13岁的英国男孩得以回国与母亲团聚。 第二代： STR （微卫星）检测（PCR技术） 线粒体DNA检测（PCR+测序） 20世纪90年代：在法医生物学方面，开始运用PCR技术检测VNTR、STR、mtDNA标志，用于个体识别和亲权鉴定。 Polymerase Chain Reaction DNA检测方法比较 RFLP 信息量大 费时（1~2周） 费力 50 ng DNA DNA 不能降解 PCR 快速 省力 1 ng DNA 适用于降解DNA 复合扩增检测 自动化 mtDNA 结构 mt DNA测序 DNA抽提； 利用两对引物，分别对HVⅠ、HVⅡ进行PCR扩增； PCR产物纯化； 利用HVⅠ的L链引物和HVⅡ的L链引物，分别对HVⅠ、HVⅡ的单链进行PCR扩增（dNTP带有四色荧光标记）； 乙醇沉淀DNA； 在测序仪上进行毛细管电泳，判读序列； 与Anderson标准序列进行比对，找出变异点。 俄沙皇Nicholas II墓穴中的骨骸 （近1000块骨头） 沙皇（Nicholas II） 皇后（Alexandra） 3个女儿 1名家庭医生 3名仆人 Nicholas II墓穴中的骨骸鉴定 皇后（Alexandra）----皇后的妹妹 ↓外孙 Philip亲王(爱丁堡公爵) 沙皇（Nicholas II） -----沙皇妹妹的女系后裔 mtDNA 存在异质性 mtDNA 信息量有限 mtDNA呈母系遗传特征 在法医学上，mtDNA检测不是主要的检测手段。 核DNA的片段长度多态性 串联重复序列 多个特定序列首尾相连而成 (卫星DNA) 在人类基因组中占 15-20% 串联重复序列的遗传多态性 串