药品的微生物学检查ppt课件.ppt

3.中草药、抗生素抑菌试验 纸片法 六、革兰染色法 原理：革兰阳性菌与革兰阴性菌细胞壁差异 应用 方法 标本片制备 革兰染色 结果 2.革兰染色 （1）初染：滴加结晶紫染液l～2滴，1分钟.水洗 （2）媒染：滴加碘液， l～2滴，作用1分钟后水洗。 （3）脱色：滴加95％酒精数滴，（约15～30秒），立即水洗。 （4）复染：滴加稀释复红染液1～2滴，作用1分钟后水洗。 （5）结果：牙垢标本中革兰阳性菌染成紫色，革兰阴性菌染成红色。其中真菌(白色念珠菌)染成紫色，而螺旋体等被染成红色。口腔中脱落的组织细胞及个别白细胞被染成红色。其细胞质呈红色，细胞核呈深红色。 实验四 药物的微生物限度检查（四） 病毒和细菌及其他病原微生物 一、目的要求 1、了解抗酸染色方法及各种病毒和细菌的菌落形态 2、掌握药品的微生物学检验程序和方法 二、实验内容 1、药物的药物的微生物限度检查（四） 1）将口服药物中的细菌分别接种：①蛋白胨水培养基； ②葡萄糖蛋白胨水培养基； ③枸橼酸盐（西蒙氏）培养基。 同时接种产气杆菌于上述培养管做对照，以备进行IMViC试验。 2）取接种在普通琼脂斜面培养基上面的外用药物中细菌进行血浆凝固酶检测,依 据 其反应结果,确定该菌的性质及名称。 2 、抗酸染色 3 、真菌培养物的观察------黑曲霉、木霉 、青霉菌菌落，白色念珠菌假菌丝， 酵母菌菌落的观察。 4 、记录中草药、抗生素抑菌试验结果 5 、观察鸡胚的结构 --------------------------------------------------- 试验 培养基 加试剂 试验结果 大肠埃希菌 产气杆菌 蛋白胨水2管 1 1 葡萄糖蛋白胨水2管 1 1 葡萄糖蛋白胨水2管 1 1 枸橼酸盐2管 1 1 实验四 药物的微生物限度检查（四） 病毒和细菌及其他病原微生物 取接种在普通琼脂斜面培养基上面的外用药物中细菌进行血浆凝固酶检测,依 据 其反应结果,确定该菌的性质及名称。 二.血浆凝固酶试验 原理：非致病性葡萄球菌不产生血浆凝固酶而致病性葡萄球菌能产生血浆凝固酶，可使含有枸橼酸钠或肝素抗凝剂的兔或人等血浆发生凝固。 方法： 1.取洁净玻片，用记号笔画两个圈并标号，其中一个滴加生理盐水另一个滴加兔血浆。 2.接种环烧灼灭菌后挑取金葡菌苔，1/2在生理盐水中研匀混悬，另1/2在兔血浆中研匀混悬，静止片刻，观察结果。 结果： 凝集呈颗粒状判定为血浆凝固酶试验（+）， 呈均匀混浊状不凝集判定为（-） 方法： 1.取洁净玻片，用记号笔画两个圈并标号，其中一个滴加生理盐水另一个滴加兔血浆。 2.接种环烧灼灭菌后挑取金葡菌苔，1/2在生理盐水中研匀混悬，另1/2在兔血浆中研匀混悬，静止片刻，观察结果。 结果： 凝集呈颗粒状判定为血浆凝固酶试验（+）， 呈均匀混浊状不凝集判定为（-） 制片（涂片、干燥、固定）； 石炭酸复红初染（加温、 盖滤纸片） 5min ---水洗； 3％盐酸酒精脱色 （ 15S,水洗）； 美兰复染（1min，水洗 ）-滤纸吸干 镜检。 抗酸染色步骤 结核杆菌 抗生素体外抑菌试验（二） 记录纸片法结果 测量抑菌环直径 病毒的分离培养—鸡胚接种 动物接种 鸡胚培养 组织细胞培养 病毒的培养方法： 病毒的分离培养—鸡胚接种 病毒名称 接种部位 鸡胚胚龄（天） 痘类病毒 绒毛尿囊膜 10～13 流感、副流感、腮腺炎病毒 尿囊 9 ～11 嗜神经病毒 卵黄囊 5～8 初次分离标本 羊膜腔 10～12 病毒的分离培养—鸡胚培养 实验五 药物的微生物限度检查（五） 一、目的要求 掌握药品的微生物学检验程序和方法 二、实验内容 以生化反应（IMViC）检测口服药中细菌的性质。 --------------------------------------------------- 试验 培