临床微生物室标本处理和操作流程.ppt

内 容 微生物鉴定 标本处理 血培养 脑脊液培养 呼吸道标本 (痰标本、咽部标本） 尿培养 生殖道标本培养 抽吸物和组织标本的培养（需氧、厌氧培养） 粪便培养 尿道感染 尿液标本 ?采集中段尿时要先用肥皂清洗女性的外阴和男性的外生殖器包括包皮内，然后用清水冲洗 ?长期留置导尿管的患者应在更换新管时留取尿标本。 ? 做厌氧培养时应耻骨上膀胱穿刺采集尿。 微生物鉴定 微生物鉴定（1） 血平皿上的菌落形态 革兰阳性细菌 所有的链球菌 β-溶血链球菌 α-溶血链球菌与肺炎链球菌 葡萄球菌属 肠道革兰阴性杆菌 沙门菌属，志贺菌属 假单胞菌属 嗜血杆菌属 微生物鉴定（2） 奈瑟菌属、莫拉菌属 不动杆菌属 布氏杆菌属、巴斯德菌属 芽胞杆菌属 产单核李斯特菌 酵母菌属 药敏试验 纸片扩散法药敏试验 特殊药敏试验 MRSA 克林霉素耐药的葡萄球菌 VISA或VRSA 青霉素耐药的葡萄球菌 超广谱β-内酰胺酶 纸片扩散法-测量抑菌圈（1） 纸片扩散法-测量抑菌圈（2） 致谢： Ms Ellen Jo Baron (Stanford Univ.Dept.Pathology) Ms Janet Hindler (UCLA Medical Center Los Angeles ,California) 提供“临床微生物实验室基本操作流程”图片资料。 使用透射光观察 ： Staphylococcus spp. 葡萄球菌属 linezolid利奈唑烷 oxacillin苯唑西林 vancomycin万古霉素 任何生长均有意义Enterococcus spp.肠球菌属 vancomycin万古霉素 Light光线 使用反射光观察： 所有其他药物/菌株组合 Light光线 变形杆菌属…. 忽略迁徙性生长 纸片扩散法-测量抑菌圈（3） 测量完全抑菌的圈 纸片扩散法-测量抑菌圈（4） Linezolid 利奈唑烷 铜绿假单胞菌耐药亚群 ；测量无菌区域 圈内菌落 纸片扩散法-测量抑菌圈（5） 大肠埃希菌混杂有肠球菌；用纯培养重复试验 你看见多少种形态？ 几种细菌的混合形态，缺乏鳞状上皮细胞=混合厌氧菌感染。如果是呼吸道标本可能是吸入性肺炎。报告临床医生“提示吸入性肺炎” 呼吸道标本中未被染色的，有折射的杆菌=抗酸杆菌 呈链排列的革兰阳性球菌？或革兰阳性分枝杆菌？ 肺中的结节吸出物，不规则“球菌”，分叉，无短链，链的末端的呈尖状，都证明是分枝状的革兰阳性杆菌，可能是放线菌或诺卡菌（通常来自脑或肺组织的标本） 肺炎-可接受的 不合格标本 评述 很少的鳞状上皮细胞 10个每低倍视野 许多鳞状上皮 10个/低倍视野 可以在玻片上看到许多鳞状上皮细胞，说明在采集时受到了上呼吸道分泌物的污染或口水的污染。 很多的中性粒细胞 很少有或没有中性粒细胞 免疫抑制的病人也会出现中性粒细胞减少 中性粒细胞和上皮细胞都很少的标本需要培养 很多中性粒细胞混合有形态多样的细菌（革兰氏阴性杆菌，纺锤形，革兰氏阳性球菌） 吸入性肺炎标本革兰氏染色的典型形式，培养只会培养出正常菌群，所以革兰氏染色是用于诊断的方法。 许多或中等量的中性粒细胞，以一种形态的细菌为主 酵母菌样，酵母菌是一种很少引起肺炎的细菌，常由口腔污染 成双革兰氏阳性球菌，短链=肺炎链球菌 革兰氏阳性菌成群排列=金黄色葡萄球菌 革兰氏阴性球杆菌（小）=流感嗜血杆菌 革兰氏阴性杆菌大且肥厚=肺炎克雷伯菌或其他肠道菌 革兰氏阴性双球菌=卡他莫拉菌 许多不着色的有折射的杆状细菌 可能是肺结核，抗酸杆菌不能被革兰氏染色所染色。 呼吸道标本的涂片评估模式 每年850万例尿路感染, 90%为女性 1/2.5个妇女在一生中会得UTI 下行性感染：血流?肾脏?膀胱（金黄色葡萄球菌，酵母菌，结核分枝杆菌） 上行性感染：尿道?膀胱?肾盂? 血流 用于尿液培养的标本 ?肾活检或肾抽吸物（外科） ?耻骨上膀胱抽吸物 （孕妇，婴儿，全膀胱） ?微导管尿（内部导管和外部导管）-老年人 ?中段尿，清洁留取——急诊成年人 ?留置导尿管中采集的标本（经常被三种以上细菌污染） 尿液运输方法 如不能及时送检，需冷藏。 4小时延迟送检，须废弃标本。 过夜