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CXCR3在银屑病患者表达及其临床意义 　　【摘要】 目的 研究银屑病患者皮损内趋化性细胞因子受体CXCR3的表达及其临床意义。方法 利用荧光定量聚合酶链反应法测定20例寻常型银屑病患者皮损内及17例正常对照者皮肤中CXCR3 mRNA的定量表达，采用直线相关回归分析方法分析CXCR3 mRNA的表达与银屑病病情严重程度(PASI)的关系。结果 银屑病皮损内CXCR3 mRNA高于正常对照者皮肤内的表达水平(P 　　【关键词】 银屑病；趋化性细胞因子受体；CXCR3；荧光定量聚合酶链反应 　　文章编号：1003-1383(2007)04-0362-02 　　中图分类号：R 758.63 　　文献标识码：A 　　 　　Expression and clinical significance of CXCR3 mRNA in patient with psoriasis vulgaris 　　MA Ze-lin?1，ZHOU Zhi-gang?1，Li Chang-xing?1，Hu-Bin?2 　　(1.Dongguan Hospital of Chronic Disease，523008 Dongguan，2.Daan Gene Diagnostic Center of Sun Yat-sen University，510080 Guangzhou) 　　 　　【Abstract】 Objective To study the expression and clinical significance of chemokines receptor CXCR3 in psoriatic lesional skin.Methods Twenty adult patients with psoriasis vulgaris and 17 health people were sequentially chosen in this study. The production CXCR3 mRNA was measured by Fluorescence Quantitative Polymerase Chain Reaction Method. The relationship between CXCR3 and disease severity(PASI) was assessed by linear regression and correlation.Results Expression of CXCR3 mRNA in psoriasis lesional skin was higher than that in control group(P[1~3]。炎性细胞浸润运动需要在局部形成适当的趋化因子浓度梯度，同时相应的靶细胞在趋化因子的作用下向局部迁移[3]，因而趋化因子及其受体在本病发病机制中的研究越来越受到重视。为进一步研究趋化因子受体在银屑病发病中的作用，本研究采用荧光定量PCR法定量测定CXCR3在银屑病患者皮损内的表达及探讨其临床意义，现将结果报道如下。 　　 　　资料和方法 　　 　　1.一般资料 20例寻常型银屑病患者为2006年1～6月东莞市慢性病防治院皮肤科门诊患者(进行期)，其中男11例，女9例；年龄范围20～46岁(平均36.8岁)；病程10天～3年。所有患者治疗前2个月内未系统应用免疫抑制剂或皮质类固醇制剂或中药制剂；银屑病皮损严重指数(PASI)为8.9~48.6(30.1±14.1)。正常对照组17例为健康者外科整形手术切除的皮肤???其中男9例，女8例，年龄范围20～46岁(平均36.8岁)。 　　2.方法 　　(1)RNA的提取：组织块置匀浆器，加TRIZol冷冻匀浆，提取后的RNA，-80℃保存备用。 　　(2)RNA样品鉴定：电泳检查：每样品取5 μl RNA置1%的琼脂糖凝胶上电泳，泳毕溴化乙锭染色20 min，置紫外灯下观察。紫外分光光度计测吸光度值及计算样品浓度。 　　(3)引物的设计和合成：参考16 sRND基因文库设计引物，CXCR3引物序列如下：FO：5-CCG TCC AGT GGG TCT TTG G -3，RO：5-CTG CGT AGA AGT TGA TGT TGA AGA G -3，引物扩增片断长度为72 bp，TaqMan Probe：5-FAM- TCT GGC CTC TGC AAA GTG GCA -TAMRA-3，由ABI 3900台式高通量DNA合成仪合成。 　　(4)逆转录反应：取4 μl RNA模板做逆转录反应，仪器为PE9700PCR仪，反应体系如下：(德国QIAGEN 公司RT PCR试剂盒)5×逆转录buff