fw04806对her2阳性乳腺癌细胞的抗肿瘤作用及其联合lapatinib协同作用的机制研究-antitumor effect of fw 04806 on her 2 positive breast cancer cells and its mechanism of synergistic effect with lapatinib.docx

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2018-06-04 发布于上海
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fw04806对her2阳性乳腺癌细胞的抗肿瘤作用及其联合lapatinib协同作用的机制研究-antitumor effect of fw 04806 on her 2 positive breast cancer cells and its mechanism of synergistic effect with lapatinib

目录英文缩略词表1中文摘要2ABSTRACT4前言 6第一部分FW-04-806对HER2阳性乳腺癌抗肿瘤作用机制的研究8第一节FW-04-806对HER2阳性乳腺癌细胞的增殖抑制作用81 材料82 实验方法103 结果124 讨论14第二节FW-04-806促进HER2阳性乳腺癌细胞凋亡的作用141 材料142 实验方法163 结果174 讨论20小结21第二部分FW-04-806联合Lapatinib对HER2阳性乳腺癌体内外协同抗肿瘤作用机制的研究22第一节FW-04-806联合Lapatinib体外协同抑制HER2阳性乳腺癌细胞增殖作用的研究221 材料222 实验方法243 结果254 讨论27第二节FW-04-806联合Lapatinib增强促进HER2阳性乳腺癌细胞凋亡的作用281 材料282 实验方法303 结果304 讨论32第三节FW-04-806联合Lapatinib体内协同抗肿瘤作用机制的研究331 材料332 实验方法363 结果384 讨论41小结41结论43致谢44参考文献45综述49英文缩略词表英文缩写英文全称中文名称FFW-04-806双唑环的大环内酯类化合物IC5050%InhibitionConcentration50%抑制浓度PBSpHospHateBuffer Saline磷酸盐缓冲液DMSODimethylsulfoxide二甲基亚砜FBSFetalbovineserum胎牛血清HRPHorseradishperoxidase辣根过氧化物酶PVDFpolyvinylidene fluoride聚偏氟乙烯SDSsodiumdodecylsulfate十二烷基硫酸钠UVUltraviolet紫外CICombinationIndex结合指数HER2humanepidermalgrowthfactorreceptor-2人类表皮生长因子受体2 Hsp90Heatshockprotein90热休克蛋白90FITCfluoresceinisothiocyanate异硫氰酸荧光素PIPropidiumIodide碘化丙啶LLapatinib拉帕替尼MTT3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-dipHenyltetra3（-4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-SDSzoliumbromidesodiumdodecylsulfatepolyacrylamide gel electrophoresis二苯基四氮唑溴盐十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺电泳EDTAEthylene diaminetetraacetic acid乙二胺四乙酸1FW-04-806对HER2阳性乳腺癌细胞的抗肿瘤作用及其联合Lapatinib协同作用的机制研究中文摘要目的：研究FW-04-806 单用及其联合Lapatinib对HER2阳性乳腺癌细胞体内外协同抗肿瘤作用机制探讨。方法：(1)四甲基偶氮唑蓝(MTT)法体外检测FW-04-806抑制HER2阳性乳腺癌细胞SKBR3、BT-474、MDA-MB-453 的增殖作用；(2)通过FITC/PI双染法检测FW-04-806 促进HER2阳性乳腺癌细胞的凋亡作用；(3)通过ComPusyn软件探究FW-04-806 联合Lapatinib的协同作用；(4)采用FITC/PI双染法检测FW-04-806 联合Lapatinib具有协同诱导HER2 阳性乳腺癌细胞凋亡的作用；(5)应用蛋白印记检测FW-04-806、Lapatinib及FW-04-806联合Lapatinib对凋亡蛋白及PI3K/AKT和Ras-Raf-MAPK等信号通路相关蛋白的影响；(6)通过动物实验，测定FW-04-806、Lapatinib及FW-04-806 联合Lapatinib在体内对HER2阳性乳腺癌细胞的抗肿瘤作用研究；(7)免疫组化法测定FW-04-806、Lapatinib及FW-04-806联合Lapatinib 对HER2阳性乳腺癌细胞中HER2 蛋白作用。结果：(1)FW-04-806 呈剂量依赖性的抑制HER2阳性乳腺癌细胞SKBR3、BT-474、MDA-MB-453 的增殖；(2)FW-04-806 可诱导HER2阳性的乳腺癌细胞SKBR3、BT-474、MDA-MB-453 凋亡；(3)通过ComPusyn 软件发现FW-04-806 联合Lapatinib 对HER2阳性乳腺癌细胞具有较好的协同作用，能够明显抑制HER2 阳性乳腺癌细胞的增殖；(4)FW-04-806联合Lapatinib能够增强HER2阳性乳腺癌细胞的凋亡, 并且作用比单用效果更好；(5)FW-04-806联合Lapatinib能够双重阻断PI3K/AKT和Ras-Raf-MAPK等信号