儿童麻疹疫苗接种后远期抗体水平及th1th2细胞因子分泌的研究-study on long-term antibody level and th1th2 cytokine secretion in children after measles vaccination.docx

儿童麻疹疫苗接种后远期抗体水平及Th1/Th2细胞因子分泌的研究中文摘要目的：检测儿童接种麻疹疫苗后远期血清抗体水平，评价其体液免疫持久性；检测儿童麻疹疫苗接种后疫苗刺激T细胞亚群分泌细胞因子，探讨疫苗接种后远期细胞免疫；为麻疹疫苗免疫策略提供理论依据。方法：(1)选择麻疹疫苗接种后3～10年的儿童健康志愿者32名，每名志愿者抽取5ml外周血；其中2ml待自然凝后离心分离血清，用ELISA法检测麻疹抗体。(2)取3ml外周血分离淋巴细胞，用10%FBS-RPMI-1640液调整细胞数为1×106个/ml，设实验组（麻疹疫苗刺激组）与对照组，置5%CO2培养箱，37℃，培养50 小时，取上清液检测细胞因子。(3)用流式CBA法检测全部细胞培养上清液中TNF-α，IL-10细胞因子。(4)用ELISA法检测部分细胞培养上清液中IFN-γ，TNF-α，IL-4，IL-10细胞因子。结果：(1)用ELISA法检测血清中抗体水平：结果显示32例抗体浓度均值为115.03IU/L，标准差为95.20IU/L。接种疫苗儿童抗体水平差异较大，高应答组抗体水平明显高于应答组和低应答组，p0.05；(2)用流式CBA方法检测淋巴细胞培养上清液中TNF-α的水平，实验组中位数2021.81pg/mL，对照组中位数1481.72pg/mL，实验组的TNF-α分泌水平明显高于对照组，经Wilcoxon配对符号秩和检验，p0.05。根据麻疹抗体水平给予分组比较，应答组及高应答组中实验组与对照组比较有明显差异，经Wilcoxon配对符号秩和检验p0.05，低应答组中，实验组与对照组无明显差异，经Wilcoxon配对符号秩和检验，p0.05；(3)用流式CBA方法检测淋巴细胞培养上清液中IL-10水平，实验组中位数2566.93pg/mL，对照组中位数1861.89pg/mL，实验组明显高于对照组，经Wilcoxon配对符号秩和检验，p0.05。根据麻疹抗体水平给予分组比较，在低应2答组及应答组中实验组均明显高于对照组，经Wilcoxon配对符号秩和检验，p﹤0.05，而高应答组中，实验组与对照组比较，经Wilcoxon配对符号秩和检验，p0.05，两者无明显差异；(4)用ELISA法检测淋巴细胞培养上清液中Th1细胞因子IFN-γ、TNF-α水平，实验组、对照组IFN-γ浓度均值分别为152.07pg/mL、187.31pg/mL，经配对样本t检验，p0.05，差异无统计学意义；TNF-α浓度均值分别为160.92pg/mL、129.57pg/mL，经配对样本t检验，差异有统计学意义，p﹤0.05；(5)用ELISA法检测淋巴细胞培养上清液中Th2细胞因子IL-4、IL-10水平，实验组、对照组IL-4浓度均值分别为182.55pg/mL、190.87pg/mL，经配对t检验，P0.05，差异无统计学意义；IL-10浓度均数分别为554.46pg/mL、398.94pg/mL，经配对t 检验，差异有统计学意义，p﹤0.05。结论：(1)32 例儿童麻疹疫苗接种后3～10 年抗体阳性率高，阳性率81.2%，抗体水平均值为115.03IU/L；但抗体水平与年龄、性别、接种次数及接种后时长无明显关系。(2)32例儿童麻疹疫苗接种后麻疹疫苗特异性再刺激后细胞因子：TNF-α、IL-10水平明显升高，表现Th1/Th2细胞因子疫苗刺激后分泌增高，提示体内存在免疫记忆T细胞，在接触抗原刺激后通过分泌细胞因子可介导免疫应答。关键词：儿童；麻疹疫苗；免疫接种；远期效果；抗体；细胞因子3Theresearchofthelongtermantibody levelsandthesecretingofTh1/Th2cytokinesafterimmunizationwithmeaslesvaccineforchildrenAbstractObjective: Todetectthechildren’sserum antibodyandcytokinessecretedby differentTcellsubsetsaftervaccinationwithmeaslesvaccine,toevaluateitspersistenceofhumoralimmunityandcellularimmunity,sothatwecanprovidetheoreticalbasisformeaslesvaccineimmunizationstrategies.Methods:32childrenwhohavevaccinatedwithmeaslesvaccinefor3~10yearswerechosenashealthyvolunteers.Everyvolunteertakes5m