ATRP法制备PDMAEMA嵌段共聚物用于基因载体的功能研究.pdf

摘要 摘要 基因治疗是治疗多种疾病的一种强有力的手段。能：否有效的将目的基因传递 至病灶部位是基因治疗能否成功的关键。这是因为DNA是携带负电的生物大分 子，而DNA是很难依靠自身进入细胞内部的。此外，DNA在做体内治疗的时候， 很容易被DNA酶降解。因此必须要通过载体来进行有效的基因传递。聚阳离子 非病毒载体由于其较好的生物安全性，易于制备和修饰等优势而被广泛应用。但 是现今聚阳离子载体仍普遍存在着高细胞毒性和靶向能力差等缺点。 本课题研究工作分为两部分，其中一部分工作为结合原子转移自由基聚合方 法和点击化学的方法分别制备了具有甘露糖和半-fl。糖结构的pH敏感型含糖聚 合物PEG—a．P(Gal．CO．DMAEMA)*N 表明，两种pH敏感的含糖聚合物与DNA形成的复合物在生理pH条件和血清 环境下很稳定。并且复合物在pH5．0条件下孵化2小时即可以实现PEG的解离， 显示出较好的pH响应性。细胞转染实验表明，针对半乳糖受体过表达的人肝癌 细胞HepG2以及甘露糖受体过表达的小鼠巨噬细胞Raw264．7， 40％。 本课题另一部分工作是通过原子转移自由基聚合方法制备末端带有马来酰 亚胺活性基团的聚甲基丙烯酸N，N二甲氨基乙酯(PDMAEMA)。然后将带有巯 确认各步反应产物，GPC测定聚合物相对分子量及分子量分布。琼脂糖凝胶电 与DNA形成的稳定复合物粒径为10nm左右。随后对转铁蛋白受体过表达的Hela 细胞进行转染实验，TGPDMAEMA相对于修饰前表现出较高的转染效率。 关键词：基因治疗；非病毒基因载体；聚甲基丙烯酸．N，N．二甲氨基乙酯；含糖 聚合物；原子转移自由基聚合 Abstract Uene 1Sa therapy methodto mighty treatvarious isme disea，ses．Deliverysystem cmxtoeffective gene DNA therapy．Becauseisonekind of biomacromolecule with negatively can charge，it intocell barelypenetrate membrane itself．Moreover． by naked DNAcanbe serum degraded nucleasesin by vivo．For this reason，asuitabale came¨s gene for successful obligatory gene nonviral delivery．Polycationic2