“TO”型生物制片透明剂应用.doc

“TO”型生物制片透明剂应用 　　[摘要]目的:应用TO型生物透明剂代替二甲苯进行病理制片。传统的病理制片一直延用甲醛和二甲苯,然而,这些试剂对人体的危害已经引起了人们的关注。引进先进设备,改善环境,加强防护,虽然可以减少污染,但是,这些措施都不能解决根本问题。于是就试用TO型生物透明剂替代二甲苯制片。方法:组织脱水。在全自动封闭式脱水机13个脱水缸中,各加入溶液2500ml,其中,AFⅠ-Ⅱ各40min,95%乙醇Ⅰ～Ⅲ各40min,无水乙醇Ⅰ～Ⅲ各40min,TO型生物透明剂Ⅰ～Ⅱ各40min,石蜡Ⅰ～Ⅳ各40min。透明剂的处理,一种是在室温下进行,一种将TO型生物透明剂加温至36℃。脱水后进行包埋制片。根据制片顺利程度,切片质量,统计出蜡块数,推断出TO型生物透明剂的消耗情况,并及时给予更新。切片脱蜡与透明,脱蜡缸3个,透明缸2个,每缸加TO型生物透明剂400ml,各5～10min。封片,将固体中性树胶溶于TO型生物透明剂中,调好稠度便成为芳香型封片剂。封好的切片放入烤箱数小时后就可供阅片。结果:把其他条件设为最佳状态,对室温和加温制成的蜡块的制片情况进行观察。随机抽查室温下制成的蜡块1114块,其中,116块制片失败(10.41%),998块制片成功(89.59%),加温制成的蜡块1482块,其中,6块制片失败(0.4%),1476块制片成功(99.6%)。结果表明,TO型生物透明剂经加温36℃制成的蜡块可以获得很好效果。蜡块统计数表明,每制成1450个蜡块,TO型生物透明剂的透明效果就要降低,应当更新。TO型生物透明剂在切片脱蜡时,每当充分脱掉1112张腊片,其脱蜡效果就会下降,只有及时更新方可保证质量。切片染色脱水后透明,TO型生物透明剂因为挥发慢,完全可以避免二甲苯因挥发快引起的组织干裂。参照中华医学会临床技术操作规范病理学分册,关于常规石蜡包埋HE染色切片质量的基本标准,抽查切片1265张,甲级片1124张(88.85%),乙级片77张(6.09%),丙级片64张(5.06%)。切片优良率为94.94%,完全可以与使用二甲苯制片质量相蓖美。结论:TO型生物透明剂代替二甲苯效果比较满意。组织脱水透明时,给TO型生物透明剂加温可以取得理想的效果。在切片透明方面效果比较理想。而在封片后必须在烤箱放置一定时间才好阅片。TO型生物透明剂挥发性有轻微的刺激作用,应当设法避免。 　　[关键词]TO型生物透明剂;病理制片 　　[中图分类号]R446 　　[文献标识码]A 　　[文章编号]1006-1959(2009)11-0262-02 　　 　　传统的病理制片一直延用甲醛和二甲苯,然而,这些试剂对人体的危害已经引起了人们的关注[1-4]。引进先进设备,改善环境,加强防护,虽然可以减少污染,不过这些措施都不能解决根本问题。于是,一些试图应用其他试剂替代二甲苯制片的文章陆续发表[2-6]。本文谈一点使用TO型生物制片透明剂制片的体会。 　　 　　1 材料与方法 　　 　　在小批量试验取得成功的基础上,于2004年开始,用TO型生物透明剂常规制片。TO型生物透明剂,广西岑溪市松香厂研制,以优质松节油为主要原料制成的无色,无毒芳香透明液体,折光率1.4580～1.470,25℃以上能与95%酒精互溶。能溶解石蜡和封固树胶。 　　 　　1.1 组织脱水,在全自动封闭式脱水机13个脱水缸中分别加入溶液2500ml,其中,AFⅠ-Ⅱ各40min,95%乙醇Ⅰ～Ⅲ各40min,无水乙醇Ⅰ～Ⅲ各40min,TO型生物透明剂Ⅰ～Ⅱ各40min,石蜡Ⅰ～Ⅳ各40min。透明剂的处理,一种是在室温下进行,一种是将TO型生物透明剂加温至36℃。脱水后进行包埋制片。根据切片制顺利程度,统计出蜡块数,推断出透明剂的消耗情况,并及时给予更新。 　　 　　1.2 切片脱蜡与透明,切片染色前,用TO型生物透明剂Ⅰ～Ⅲ,每缸400ml,脱蜡5～10min。切片染色脱水后用TO型生物透明剂Ⅰ～Ⅱ,每缸400ml,透明5～10min。其他条件不变。统计出切片数,根据切片质量推断出溶剂更新时间,并及时更换。 　　1.3 封片,将固体中性树胶溶于TO型生物透明剂中,调好稠度便成为芳香型封片剂[2、3]。封好的切片放入烤箱数小时后就可供阅片。 　　 　　2 结果 　　 　　2.1 只有经过充分固定、脱水、透明、浸蜡的组织所制成的腊块,才能切出质量上乘的蜡片,才能成功地制出令人满意的优质切片。我们在切片时已经不再使用防脱剂,完全靠蜡片自然牢固地附贴在载玻片上。因此,对蜡块的质量要求更加严格。我们把其他条件设为最佳状态,对 　　室温和加温制成的蜡块的制片情况进行观察。随机抽查室温下制成的蜡块1114块,其中,116块制片失败(10