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关于实验室几种常用梅毒检测方法优劣及应用上比较 （广西省陆川县疾病预防控制中心广西陆川537700）【摘要】梅毒最普遍的检测方法是梅毒血清学检查法，其中TRUST法存在着一定的漏检率，然TRUST法检测为阳性可辅助判断为现症感染，能为医生提供诊治依据。ELISA法，其灵敏度和特异性都较高，与TPPA法检测结果间差异无统计学意义［1］，是实验室理想的检测初筛方法。TPPA法是公认的梅毒确证试验。现许多血站已同时采用ELISA和TRUST法对献血者进行初复检检测［2-3］，两方法互补，灵敏度和特异性同TPPA法。TP-WB方法更是一种更好的确认试验。梅毒各类检测方法各有优劣，而也适应于各级实验室不同的选择，本文对常用梅毒检测方法进行了总结。【关键词】实验室；梅毒；梅毒血清学诊断【中图分类号】R741.3【文献标识码】A【文章编号】1004-5511（2012）04-0643-01 大量的临床资料以及有关的流行病学调查结果显示，在我国梅毒的发病率有逐年上升的趋势［4～5］； 目前对梅毒的实验室诊断主要分为梅毒螺旋体暗视野检查法和梅毒血清学试验及脑脊液检查［6］，因此，总结出适合用于各级实验室检测方法，对于该疾病的预防、治疗以及筛查梅毒感染者无疑具有十分重要的意义。现较为常用的梅毒检验方法为血清学试验，即检测梅毒螺旋体侵入机体产生的两种抗体（梅毒螺旋体非特异性抗体及特异性抗体）。1梅毒螺旋体非特异性血清学试验 　　 　　 1.1甲苯胺红不加热血清试验(TRUST):抗原以胆固醇晶粒为载体，包被上心磷脂和卵磷脂，构成VDRL抗原颗粒。再把抗原颗粒结合到甲基胺红上，当抗原与血清中反应素以一定的比例相互作用时，出现凝集，凝集颗粒呈红色。 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 1.2 快速血浆反应素试验(RPR):抗原以胆固醇晶粒为载体，包被上心磷脂和卵磷脂，构成VDRL抗原颗粒。再把抗原颗粒结合到活性炭上，当抗原与血清中反应素以一定的比例相互作用时，出现凝集，凝集颗粒呈黑色。 　　2梅毒螺旋体特异性血清学试验 　　2.1梅毒胶体金层析法（TP-CG）：根据双抗原夹心免疫层析原理，在硝酸纤维素膜上包被TP重组抗原，在玻璃纤维上吸附胶体金标记TP重组??原，样品中的TP抗体首选与金标抗原结合形成复合物，顺膜渗透至包被反应区，与包被TP抗原结合，形成由胶体金抗原-TP抗体-抗原组成的紫红色反应带。 2.2梅毒酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)：在体外表达得到了梅毒螺旋体的相应特异基因工程抗原，采用基因工程梅毒螺旋体抗原以双抗原夹心法检测梅毒抗体。 　　 2.3梅毒螺旋体血细胞凝集试验(TPHA):将梅毒螺旋体Nichols株经超声破碎后，得到可溶性抗原成分，致敏红细胞。用无毒株Reiter株制成吸收剂与血清反应，吸收掉血清中的非特异性抗体。特异性的抗体(血清通常用作1∶80以上稀释)就可使致敏的红细胞发生凝集作用。 　　 　　 2.4梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）:用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒替代TPHA试验中致敏的红细胞，明胶颗粒为洋红色，致敏颗粒与人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体结合，产生可见的凝集反应2.5梅毒蛋白印迹（TP-WB） 首先将将梅毒螺旋体Nichols株菌体细胞用SDS破碎，再使用聚丙烯酰胺凝胶电泳将将梅毒螺旋体各种抗原成分分开形成不同区带，经电转印可将这些条带转移至硝酸纤维素膜上作为抗原，最后采用酶标技术检测病人血清中的相应特异抗体。3方法优劣及应用 　　 　　TRUST或RPR法检测反应素，是人体感染梅毒螺旋体后组织受到破坏裂解出来的一种类脂成分。TRUST、RPR的优点是测定操作简便快速，两法检测为阳性可辅助判断为现症感染，能为医生提供诊治依据。实验证明梅毒血清学试验RPR,TRUST方法的灵敏度和特异性均不及ELISA法；事实上也存在一定的假阳性率和假阴性率。TP-CG 和 TP-ELISA法采用基因工程体外表达得到的梅毒螺旋体特异抗原包被，检测血清中的梅毒特异性抗体(IgM和IgG)，这种抗原较之以前从整个梅毒螺旋体经超声波裂解所得抗原要纯得多，测定的特异性大为提高。ELISA法，其灵敏度和特异性都较高，但ELISA法梅毒抗体阳性，尚不能判定是否为现症感染，不能为医生提供诊治依据；然ELISA法能实现实验室“三化”自动化、标准化和规范化，资料能很好保存。胶体金方法经过验证，敏感性明显基本与TPHA等相当。ELISA、CG法还具有简单、快速和高通量的优点，是血站、医院检验科、医院输血科和其他高危人群梅毒血清学检测初筛的首选方法。 　　 TPHA或TPPA法是目前公认的梅毒确认试验，它直接用Nichols株螺旋体提取抗原，特异性强。但是血细胞凝集法操作过程中影