SPRR1A基因真核荧光表达载体的构建(期刊)..pdfVIP

蚌埠医学院学报 2009年2月第34卷第2 97 — 塑 [文章编号]1000-2200(2009)02-0097-03 · 基 础 医学 · SPRR1A基因真核荧光表达载体的构建 张 鼎 ，孙西美 ，邵正仁 ，陈传好 [摘要]目的：构建可在真核细胞中表达 SPRR1A (smallproline—richrepeatprotein1A)的荧光表达载体。方法：应用 PCR技术 扩增出编码SPRR1A的全长基因，将SPRR1ADNA克隆到pEGFP—NI质粒，通过抗性基因筛选阳性克隆，经酶切和测序鉴定。 结果：酶切和DNA序列鉴定均证实插人片段与GenBank提供的序列 (L05187)一致。结论：成功构建了SPRR1A真核荧光表 达载体 。 [关键词]神经元纤维；基因表达；调节；SPRR1A；真核荧光表达载体 [中国图书资料分类法分类号]R322．85；Q343．1 [文献标识码]A Constructionforfluorescenteukaryoticcellexpressionvectorof smallproline-richrepeatproteinIA gene ZHANG Ding ，SUN Xi—mei，SHAOZheng—ren ，CHEN Chuan—hao (1．DepartmentofBiolog)Science，2．TheLibrary，3．DepartmentofAnatomy，BengbuMedicalCollege，BengbuAnhui233030，China) [Abstract]Objective：Toconstructfluorescenteukaryotieexpressionvectorofsmallproline—richrepeatprotein1A(SPRR1A)gene． M ethods：ThecodingsequenceofSPRR1A wasamplifiedbypolymerasechain reaction，theSPRR1A genewasclonedintoplasmid pEGFP—N1，and the recombinantvector was selected and identified by restriction enzyme analysis and nucleotide sequence determination．Results：Correctconstruction ofpEGFP—N1一SPRR1A wasidentified by methodsofrestriction enzyme analysisand nucleotide sequence determination． Conclusions：Eukaryotic expression plasmid pEGFP—N1一SPRR1A has been successfully constructed． [Keywords]neurofibrils；geneexpression；regulation；smallproline—richrepeatprotein1A；fluorescenteukaryotiecellexpression vector 周围神经损伤常导致神经元轴突的连续性 中 分子生物学技术扩增出人 SPRR1A全长基因，并构 断，从而引起神经功能缺陷，这将给患者造成严重后 建 SPRR1A真核荧光表达载体，以期为进一步开展 果。因此，促进轴突生长并使其与所分布的靶器官 SPRR1A转基因研究奠定实验基础。 重新形成突触连接而达到形态和功能上的恢复成为 1 材料与方法 治疗周围神经损伤的关键。神经元轴突的再生常受 到损伤部位 内源性