Waddles小鼠遗传性小脑性共济失调分子机制的研究(期刊)..pdfVIP

维普资讯 天津医药 2008年 7月第 36卷第 7期 527 Waddles小鼠遗传性小脑性共济失调分子机制的研究 张佩兰 程 焱 王旭光 张辰昊 摘要 目的：探讨引起waddles(wd1)小鼠遗传性小脑性共济失调的分子机制。方法：采用成年2～4个月的Wdl 小鼠30只和同等数量同胎生的正常小鼠进行试验。对从Wdl小鼠和正常小鼠提取的mRNA进行Northern杂交；使 用亲和法提纯的家兔的CAR8蛋白多克隆抗体进行Westernblot分析；应用免疫组织化学方法研究Wdl小鼠CAR8 蛋白是否缺乏。结果：Wdl小鼠的Car8基因转录水平明显降低，而+ dl小鼠Car8基因的转录水平介于正常和Wdl 小鼠之间。在正常和+ dl小鼠的小脑细胞中可见CAR8蛋白的表达且表达量相似，而在Wdl小鼠的小脑细胞中则 不能探查到CAR8蛋白的表达。在正常、杂合子及wdl小鼠，1，4，5-三磷酸肌酸受体 1(IP3R1)蛋白表达无明显差 别。正常小鼠的CAR8和 IP3R1蛋白在小脑细胞中的位置相同，而在Wdl小鼠的小脑细胞中，仅 IP3R1蛋白的位置 与正常小鼠相同，但检测不到CAR8蛋白。结论：Wdl小鼠Car8基因突变可改变其基因表达，并导致转录水平下调及 蛋白质翻译障碍。 关键词 小脑共济失调 遗传性疾病，先天性 RNA，信使 Wdl小鼠 Car8蛋白 IP3R1蛋白 TheMolecularMechanism ofHereditaryCerebellarAtaxiainWaddlesMice ZHANGPeilan，CHENGYan，WANGXuguang，ZHANGChenhao T／a~n／HuanhuHospital，Tianjin300060，China AbstractObjective：Todiscussthemolecularmechanismofhereditarycerebellraataxiainwaddlesmice．Methods Thirtyadult(2_4months)Waddles(Wd1)miceand30wide—typelittermateswereusedforquantitativeanalysesNorthern blotting．Western blottingexaminationwereusedtoinvestigatewhetherthemutatedCra8geneaffectedtheexpressionat transcriptional，translational，orbothlevels．Immunohistochemicalapproacheswerehtenusedtoinvestigatehteimpactof Car8deficiencyinWdlmice．Results：Th eWdlmi ceexhibitedamuchlowerlevelofCra8rtanscriptionandaslightlylower levelofIP3R1transcription．Th eamountofmRNA wasintermediateinheterozygoteanimals．TheCar8proteinfrom Wdl micewasnotdetectable，whilehtelevelofproteinfrom homozygous，nomr al andheterozygousmicewassimi lra．Effectof mutationinCar8onhtetranslationlevelofIP3R1seemednodifferenceinhteproteinlevelamongnomr al，heterozygousna d Wdlmice．Conclusion：Th emuattedCra8geneinWdlmicered