特异性阻断SHH信号通路对外周血T细胞杀伤宫颈癌细胞功能影响.doc

论文评阅结果： 论文评阅人： 南方医科大学…………………………………………………………………………………...1 关键词………………………………………………………………………….……..1 研究背景………………………………………………………….…………2 1.1实验材料及设备……………………………………………….………………….3 研究方法及步骤 2.1 Hela细胞的培养…………………………………………………………...……4 2.2 RT-PCR检测Hela细胞SHH信号关键分子的表达…………………….……5 2.3 分离外周血单个核细胞（PBMC）……………………………………………6 2.4 流式细胞技术检测T细胞活化相关CD分子………………………………….6 2.5 ELISA检测T细胞功能性细胞因子IL-10和IFN-γ释放水平………………7 第三章 研究结果 3.1 RT-PCR检测Hela细胞SHH信号关键分子的表达…………………….…….8 3.2 PBMC对Hela细胞杀伤作用的形态学观察…………………………………..8 3.3 流式细胞术检测T细胞活化相关CD分子………………………………..…..9 3.4 ELISA检测T细胞功能性细胞因子IL-10和IFN-γ释放水平………………9 第四章 讨论……………………………………………………………………………………9 第五章 结论…………………………………………………………………………………..11 参考文献……………………………………………………………..………………11 摘 要 目的：研究Sonic Hedgehog分子及其活化信号对外周血T细胞杀伤宫颈癌细胞功能的影响。方法：RT-PCR检测Hela细胞SHH信号水平。在Hela与PBMC共培养体系中添加SHH抗体来阻断SHH信号，形态学观察T细胞对Hela细胞的杀伤，流式细胞术检测T细胞活化，ELISA检测T细胞功能性细胞因子IFN-γ和IL-10释放水平。结果： SHH抗体可以促进T细胞分泌功能性细胞因子IFN-γ，但抑制免疫抑制性细胞因子IL-10的分泌，增强T细胞杀伤宫颈癌细胞的效果。结论：特异性阻断SHH信号通路可以增强T细胞对宫颈癌细胞的杀伤作用。 【关键词】：SHH； 宫颈癌； T细胞 Abstract Objective: To study the Sonic Hedgehog signaling molecule and activation of T cells in peripheral blood of anti-cancer cell function. Methods: RT-PCR detection of Hela cells in SHH signal levels. PBMC were cultured in the Hela system with added SHH SHH antibody to block the signal, T cells morphology of anti-Hela cells, T cell activation by flow cytometry, ELISA detection of functional T cell cytokine IFN-γ and IL -10 release level. Results: SHH antibodies can promote T cell secretion of cytokines IFN-γ, but the suppression of the immune suppressive cytokine IL-10 secretion, enhanced T cell killing effects of cervical cancer cells. Conclusion: The specific blocking SHH signaling pathway can enhance T cell killing effect on cervical cancer cells. [Keywords] Sonic Hedgehog， cervical cancer， T cell 研究背景 肿瘤是一种常见的疾病，是机体在各种致瘤因素作用下，细胞异常增生而形成的新生物，肿瘤细胞具有异常的形态,代谢和功能。由于它的快速而无规律生长，不但消耗人体大量营养，而且破坏了正常器官的组织结构和功能目前肿瘤已经成为一列严重威害人类身