分子生物学在兽医中的应用医学.ppt

分子生物学在兽医中的应用 目录 一：分子生物学技术在中兽医药学中的应用进展 中兽医学起源于中国古代，经过数千年的发展而形成了独特的理论体系和丰富的诊疗手段，是中国历代劳动人民同疾病进行斗争的经验总结，其主要内容包括基础理论、诊法、中药、方剂、针灸和病证防治等部分。然而，要使中兽医学走向世界，仅凭传统中兽医理论是不够的，必须使之与现代医学结合，从现代医学的角度阐明中兽医辨证原理及中兽药的作用机理，实现传统中兽医药学现代化。而分子生物学使人类对生命现象、生物结构和功能的认识已产生了一系列的突破，中兽医药理论与分子生物学虽然属于两种不同的体系，但两种科学研究生命活动的物质基础是一致的，因此，从分子水平研究中兽医药，对推动中西兽医结合、促进中兽医药学的发展和防病治病很有意义。 1分子生物学技术在中兽医基础理论中的应用 1．1 阴阳学说与分子生物学技术 阴阳学说贯穿于中兽医学理论体系的各个方面，用以说明动物体的组织结构、生理功能和病理变化，并指导临床诊断和治疗，是中兽医理论的高度概括。 近几年来，我国对cAMP、cGMP与中兽医阴阳学说进行了研究。李芳生…报道，阳虚者cAMP水平升高，cAMP／cGMP比值下降；阴虚者cGMP水平升高，cAMP／cGMP比值升高。进一步分析cAMP、cGMP与阴虚和阳虚的关系可知，阳虚者表现副交感神经系统活动加强；阴虚者主要表现交感神经系统活动加强。这些研究都为推动中医理论向现代化迈进有重要意义。 《素问·至真要大论》中说“谨察阴阳所在而调之，以平为期”，是中医临床诊断和治疗的基本原则。与此理论相一致，分子生物学技术研究发现，正常细胞染色体上存在非活化状态的原癌基因，同时还存在抑癌基因。如前者激活，基因异常表达；或后者缺失而不能发挥正常细胞生长调节和终止分化作用，就可导致肿瘤发生，这说明原癌基因与抑癌基因两者平衡失调对肿瘤发生起着重要作用。 1．2脏腑学说与分子生物学技术 脏腑学说是研究动物机体各脏腑器官的生理活动、病理变化及其相互关系的学说。 肾藏精，主命门之火，是机体的先天之本，对机体的生长、发育、生殖有重要影响。杨金蓉运用“恐伤肾”原理恐吓母鼠，造成子鼠先天肾气亏虚的动物模型，然后检验子鼠胸腺核酸含量，发现恐吓各组DNA、RNA含量及RNA／DNA值均有所降低，且恐吓程度越重，降低越明显。王米渠报道受惊吓母鼠所产子鼠大脑皮层厚度变薄，尤以分子层明显变薄，说明围产期紧张情绪直接影响到下一代子鼠的生长发育。用RT—PCR技术发现肾阳虚证和下丘脑室旁核促肾上腺皮质激素的mRNA表达受抑，将肾阳虚证定位在下丘脑。脾统血，主运化，是机体的后天之本。王晓明等通过脾气虚证大白鼠模型LPO及其相关抗氧化酶变化研究，提示中医认为“脾为后天之本”在生理上同分子生物学水平的抗氧化酶活性和(含量)的正常，从而维持了生物膜的正常功能的认识相类似，对中医“脾”的本质的现代化科学解释有一定的学术意义。这一切都说明中医脏象学说是有分子生物学基础的。 1．3 中兽医证的研究与分子生物学技术 证，即证候，是对疾病发展过程中某一阶段病因、病机、病性、邪正双方力量对比等方面情况的概括，是中医的核心问题。而辨证施治就是针对证的差异，以四诊为依据，认识疾病、诊断疾病的过程。故中医有“有诸于内必行诸于外”的说法。 中兽医中的同病异治、异病同治在分子生物学上的体现就是将同一疾病不同证候和同一证候不同疾病的动物进行基因图谱表达，观察分析其基因突变、异常表达同疾病的关系。从中西医结合的角度，中医证本质的含义是指引起证发生发展的物质基础，这些物质决定着证的动态变化过程。 证研究的突破，对于解释中兽医的科学内涵，推动中医各学科的发展具有十分重要的意义。分子生物学对于蛋白质研究的突破将为证候与蛋白质的结合研究奠定基础，在这一方面，有关蛋白质芯片的深入研究和纳米技术的使用将为蛋白质的研究与中医证候的研究提供发展的契机。而证候一基因组学也是中医现阶段研究的一个重要课题，将宏观的中医证候与微观的基因功能相联系。为中医证候的现代化研究提供了新的探索路径。 目前运用分子生物学技术对于脏腑辨证的研究比较多，在一定程度上揭示了这些理论的分子生物学基础。如钟历勇等观察补肾、健脾、活血三类复方对下丘脑一垂体一肾上腺一胸腺轴(HPAT)受抑模型的下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)基因表达的影响，从分子水平阐明药物对阳虚证的主要调节点。结果表明惟有补肾药可通过提高下丘脑CRF mRNA表达来保护HPAT轴免受外源性皮质酮的抑制。 健脾药对免疫系统有直接的促进作用，而活血药对HPAT轴无任何影响，其结论是药物对肾阳虚证的主要调节位点在下丘脑。刘福春等通过H2一TdR掺入细