医学课件输血科常用实验及工作体会.ppt

发现B(A)血型1例 试管法正定AB，A抗原弱于B抗原，但是结果明显 微柱法正反定型，正反定型相符为B型，抗A抗体很强与正常抗A无差异，怀疑初检血型错误 试管法正反定型复检：正定AB，反定B型，怀疑特殊血型或标本问题 保险起见重抽标本，结果相同 怀疑A亚型B，产生抗A（以上试验我科完成） 省血液中心送检，报告A2B 发现B(A)血型1例 我科随后进行以下试验： 父母血型鉴定：父亲：O 母亲：与女儿血型表现一致，初步判为 cisAB 根据资料一般cisAB为A强B弱，产生抗B，而此例A弱B强产生抗A，与B(A)血型表现一致，高度怀疑B(A) 无法确认，送上海血液中心进行血清血及分子生物学确认 上海血液中心鉴定结果 ABO正定 抗-A 抗B 抗A1 人源抗A 人源抗B 2+ 4+W - 1+ 4+W 说明确实存在A、B抗原 ABO反定：A1细胞 B细胞 O细胞 A2细胞（6滴） 3+S - - 1+W 说明确实存在抗-A，且与A1、A2细胞同时凝集 抗-H： O细胞 B细胞 患者细胞 2+S 1+W 2+ 说明 抗H增强 上海血液中心鉴定结果 结论：患者存在AB抗原，且A弱B强；血清中存在抗A，同时和A1、A2细胞凝集；抗-H增强，符合B(A)特点 鉴定为：B（A）血型 为了进一步证实进行基因测序 结论为640碱基变异，A被G取代为B（A）*04型 B(A)血型血清学特点 B(A)血型血清学特点：同时存在AB抗原，A弱B强一般鉴定为A亚型B，但是存在抗A同时和A1A2细胞凝集，和一般A亚型B不同，一般A亚型B产生抗A1，仅和A1细胞凝集，且H抗原相对与B不增强，因A亚型B有正常的B抗原 分子生物学特点：PCR方法具有B基因和O基因，为遗传学的B型；基因测序B基因基础上发生碱基突变，使其具有部分A基因特性，因此也产生A抗原。 目前总共发现5个B（A）血型，04、05均为上海血液中心05年发现，其基因序列被收录入Genbank,除上海血液中心外国内未见其他报道，这次在我院发现实属罕见 输血科常用实验及工作体会 山东省立医院输血科 王 玉 芝 前 言 血型鉴定、交叉配血、抗体筛选试验是输血科目前最常用的试验，也是每个输血工作者应该熟练掌握的试验，根据工作经验我们认为在试验过程中一些细节容易被忽略，值得注意，现将工作中的一些体会与大家一起探讨交流，请大家提出宝贵意见。 ABO血型鉴定 1、鉴定原理：根据红细胞上有无A抗原或(和)B抗原及血清中有无相应抗体将血型分为A型、B型、AB型和O型四种 正定型（细胞定型） 反定型（血清定型） 2、方法：试管法、微柱凝胶法、玻片法 均为凝集试验 ABO血型鉴定（试管法） 1、试验材料： 正定试剂： 抗-A、抗-B（是否质控？质控要求？记录？） 抗-AB 确认弱A、B抗原，与弱A、B抗原亲 和力强,会产生较强反应。 抗-H 用于检查亚型及孟买型。 抗-A1 用于A亚型检测。 ABO血型鉴定（试管法） 反定试剂 A1细胞（为什么？）、B细胞，自制细胞的质控 O细胞 检查是否存在ABO系统以外抗体干扰ABO反定型。 自身对照 用于确认正反定型结果的有 效性,排除自身抗体对定型的干扰(如冷凝集等)。 A2细胞 用于A亚型的鉴定（有些A亚型产生抗-A1抗体而不产生抗A2）。 ABO血型鉴定（试管法） 2、试验方法： 正定：1滴2~5%被检者红细胞+1~2滴标准血清混匀，3400 转15秒（转速的选择） 反定：2滴受检者血清+1滴标准红细胞混匀离心 ABO血型鉴定（试管法） 3、结果判定： 摇动力度，细胞扣边缘情况，弱凝集的判断（亚型尤其重要） 正定预期结果3+~4+，如果出现弱凝集应该考虑是抗原减弱还是亚型，不能轻易错过。 血型判定并记录 正反不一致的思考与解决？关键在于认识发现问题 ABO血型鉴定（试管法） 4、正反不一致的原因分析 实验人员技术操作错误 红细胞标本的相关问题 血清标本的相关问题 ABO血型鉴定（试管法） 技术操作错误 试剂浓度与配比，一般问题不大，但是比例不合适可能漏检亚型 忘记加试剂，试剂工作中有可能出现 结果判定，尤其对溶血结果的认识，如果是血清标本可能遇到，56度破坏补体验证 记录错误，实际工作中对于错误报告占很大比例 标本错误 ABO血型鉴定（试管法）