2014高毒力昆虫病原线虫共生细菌菌株筛选及其杀虫活性检测.pdf

第 43 卷 增刊 昆 　虫 　学 　报 Vol 43 , Suppl. 2000 年 5 月 ACTA EN TOMOLO GICA SIN ICA May , 2000 文章编号 : (2000) 增刊009806 高毒力昆虫病原线虫共生细菌菌株的筛选 及其杀虫活性的检测 1 2 1 3 王立霞 , 潘映红 , 杨怀文 , 黄大　 ( 1 中国农业科学院生物防治研究所, 北京　100081 ; 2 中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室 , 北京　100094 ; 3 中国农业科学院生物技术研究所, 北京　100081) 摘要 : 昆虫病原线虫共生细菌是寄生在昆虫病原线虫肠道的一种细菌, 二者互惠共生。实验采用 ( ) 6 个不同种的菌株为筛选材料。共生细菌菌株的培养液经 85 %饱和度的 NH4 2 SO4 盐析 , 浓缩冻 干得到杀虫粗提物。以粗提物注射大蜡螟 Galleria mellonella 、饲喂玉米螟 Ost rinia f urnacalis 和 棉铃虫 Helicoverpa armigera , 发现 Xenorhabdus nem atophilus D43 、X . bovienii A54 、Photorhab dus luminescens HZL 和 CB8 等 4 个菌株发酵液的粗提物对昆虫有高的血腔毒性 , 菌株 A54 对昆虫 又有高的胃毒效果。由此确立 A54 为高毒力的菌株 , 其杀虫活性表现为 : 注射大蜡螟 48 h 的死亡 率为 80 % , 96 h 为 933 % ; 粗提物饲喂玉米螟 , 72 h 死亡率为 533 % , 120 h 死亡率为 100 % ; 饲喂棉铃虫 , 72 h 死亡率为 801 % , 120 h 死亡率为 90 % 。杀虫粗提物经DEAE52 柱层析分离 , 得到一个穿透峰和三个盐的梯度洗脱峰 , 其中穿透峰对昆虫有很好的胃毒效果 , 但没有血腔毒性 ; 三个盐峰均有很高的血腔毒性 , 但没有胃毒作用。穿透峰样品饲喂 2 龄、3 龄棉铃虫也有很好的 杀虫活性 , 96 h 2 龄棉铃虫的死亡率为 65 % , 3 龄棉铃虫的死亡率为 30 % ; 处理 96 h 的棉铃虫同 处理前相比体重下降 , 未死棉铃虫体重明显低于对照。 关键词 : 嗜线虫杆菌 ; 发光杆菌 ; 杀虫活性 中图分类号: Q9658 　　　　文献标识码 : A 昆虫病原线虫共生细菌存在于昆虫病原线虫的肠道内, 二者互惠共生。该菌格兰氏染色 阴性 , 属肠杆菌科细菌 Enterobacteriaceae , 共包含两个属的细菌 ———嗜线虫致病杆菌属 Xenorhabdus 和发光杆菌属 Photorhabdus 。其中嗜线虫致病杆菌与斯氏线虫 S teinernem a 共 生 , 发光杆菌与异小杆线虫 Heterorhabditis 共生。 共生菌对昆虫有很强的致病力 , 大部分共生菌注射到昆虫血腔内 , 其 LD50 仅为 1～10 个 活细胞[1 ] 。在研究中 Ensign ( 1990) 发现 , Photorhabdus l uminescens 产生一种胞外毒蛋白 , 它具有很高的杀虫活性 , 注射毫微克级的外毒素 , 即可在 12