20142015学年高中生物_专题一 第2节 基因工程的基本操作程序课件 新人教版选修.ppt

专题1　基因工程 第2节　基因工程的基本操作程序; 知识梳理;基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：____________________、______________________、_______________________________________________、_____________________________。;一、目的基因的获取;2．利用PCR技术扩增目的基因：PCR技术是一项在生物体外________特定DNA片段的核酸合成技术。 (1)原理：利用____________原理，将基因的核苷酸序列不断加以复制，使其呈指数方式增加。指数扩增约为2n(n为扩增循环的次数)。 (2)条件：已知目的基因的__________序列、________、__________、______________。;二、基因表达载体的构建;3．启动子：位于基因的________，它是__________________________的部位，驱动基因转录产生mRNA。 4．终止子：位于基因的________，能够终止________。 5．标记基因：________受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。;三、将目的基因导入受体细胞;四、目的基因的检测与鉴定; 知识梳理;知识点1 目的基因的获取;1．从基因文库获取。 基因文库是将含有某种生物不同基因的许多DNA片段导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，叫做基因文库。建立基因文库的目的就是为获得大量的目的基因做准备。如果基因文库中含有一种生物所有的基因，这个基因文库就叫做基因组文库。;如果基因文库中含有一种生物的一部分基因，这个文库就叫做部分基因文库。如以某生物的mRNA逆转录基因产生的多种互补DNA(cDNA)片段，并与载体连接后储存在一个受体菌群中的cDNA文库。基因文库就相当于某种生物的基因仓库，储备着该生物大量的基因。;2．PCR技术扩增。 PCR技术是一项在生物体外复制特定的DNA的核酸合成技术。它遵循的原理与DNA复制原理相同，条件是有一段已知的目的基因的核苷酸序列和根据该核苷酸序列合成的引物，原料是四种脱氧核苷酸，也需要多种酶(如DNA聚合酶等)。在PCR扩增仪上自动复制。 3．人工合成。 如果基因比较小，核苷酸序列又是已知的，可以人工合成目的基因，该法主要有两种：逆转录和化学合成法。;①逆转录法的操作过程为：;4．PCR技术与生物体内DNA复制的比较。;联系;例1在已知某小片段??因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是(　　) A．用mRNA为模板逆转录合成DNA B．以4种脱氧核苷酸为原料人工合成 C．将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选 D．由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA;解析：现在已知的条件只是某小片段基因的碱基序列，而没有相应的mRNA和蛋白质的氨基酸序列，所以只能以4种脱氧核苷酸为原料来人工合成。 答案：B;1．以下关于PCR技术的说法，不正确的是(　　) A．生物体内DNA的复制也称为PCR B．该技术操作过程中要遵循碱基互补配对原则 C．PCR过程中DNA的数量呈指数形式扩增 D．可在PCR扩增仪中自动完成;知识点2 基因表达载体的构建(基因工程的核心)”; 知识梳理;3．由于受体细胞有植物细胞、动物细胞、微生物细胞之分，以及目的基因导入受体细胞的方法不同，因此，基因表达载体的构建上也会有所差别，不可能是千篇一律的。;例2 基因工程又叫基因拼接技术，请回答下列问题。 (1)在该技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的________为模板，________形成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成__________。 (2)基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌和________。;解析：在基因工程中，人工合成目的基因的途径有两条，其中之一就是以信使RNA为模板经过逆转录合成目的基因。基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌和动植物细胞。 答案：(1)信使RNA(mRNA)　逆转录　双链DNA(目的基因)　(2)动植物细胞;2．下列有关基因表达载体构建过程的叙述中错误的是(　　) A．用一定的限制酶切割质粒，露出黏性末端 B．用同种限制酶切割目的基因，露出黏性末端 C．将切下的目的基因插入质粒的切口处 D．将重组DNA引入受体细胞中进行扩增;解析：基因表达载体构建过程为：先用同一种限制酶切割目的基因和载体，露出相同的黏性末端；然后将切下的目的基因插入载体的切口处；最后加入DNA连接酶将二者连接为重组DNA分子。 答案：D;点评：(1)基因表达载体也可以称为重组载体(如重组质粒)、重组DNA分子等。 (2)基因表达载体的构建不