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大蒜组织培养快繁技术研究 　　摘 要：以贵州务川紫皮大蒜茎尖为试验材料，将其接种在附加不同NAA和6-BA的MS分化培养基中，比较组织诱导、分化和生根效果。试验结果表明，以MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基诱导愈伤组织效果最好；以MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基诱导不定芽增殖的效果较好，增殖倍数达5倍；以MS+NAA 0.4 mg/L培养基的生根效果最佳。 　　关键词：大蒜；茎尖；组织培养；快繁 　　大蒜（Allium sativum L.）为百合科葱属植物，以鳞茎（蒜头）、蒜薹和幼株供食，还可生产青蒜和蒜黄，因其具有杀菌、防癌之功效，成为群众喜爱的主要蔬菜之一，且蒜薹为高档蔬菜，颇受国内外市场欢迎[1]。大蒜生产中主要用鳞茎作繁殖材料，不仅繁殖系数低，而且生产成本高。同时，在长期的无性繁殖过程中，鳞茎易感染多种病毒，造成大蒜种性退化，使大蒜的产量和商品质量降低。而利用组织培养技术快速繁殖大蒜，不仅可提纯复壮，还可解决连年种植导致的种性退化等问题[2，3]。遵义务川紫皮大蒜为贵州优质大蒜品种，但其在长期栽培过程中也存在种性退化的问题，严重影响当地大蒜产业的发展。因此，本试验旨在通过研究不同植物激素配比对大蒜愈伤组织的诱导、不定芽分化及生根的影响，加快大蒜繁殖速度、提高繁殖率、增加繁殖倍数，为进一步快繁务川大蒜提供依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　贵州务川紫皮大蒜。 　　1.2 试验方法 　　①外植体的选取和消毒 选取完好的蒜瓣，用蒸馏水冲洗数次后，小心切开，将其内的茎尖取出，先用75%的酒精消毒30 s，再用0.1%的升汞消毒10 min，用无菌水冲洗5次，小心切取0.2~0.5 cm的茎尖待用。 　　②愈伤组织的诱导 将大蒜茎尖接种在附加不同浓度的6-BA（0.2，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mg/L）和NAA（0.2，0.5 mg/L）组合（共14个处理）的MS培养基中，每瓶接种3个茎尖，每个处理10瓶，接种30 d后统计愈伤组织的诱导率。 　　③不定芽的诱导 将产生的愈伤组织切成 　　1 cm×1 cm的小块，并接种于附加不同浓度的6-BA（0.2，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mg/L）和NAA（0.1， 　　 　　0.5 mg/L）组合（共14个处理）的MS培养基中，进行不定芽的诱导。每瓶接种1块，每个处理10瓶，接种30 d后统计诱导率。 　　④根的诱导 选取生长旺盛的再生芽，从其基部与愈伤组织切离，分别接种于附加不同浓度NAA（0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 mg/L）（6个处理）的MS培养基中生根。每瓶接种1个芽，每个处理10瓶，30 d后统计生根情况。 　　⑤培养条件 将培养材料放在培养室内培养。培养室温度24~26℃，光照强度2 000~3 000 lx，每天光照14~16 h, 相对湿度为60%以上。 　　2结果与分析 　　2.1 不同浓度6-BA和NAA组合对大蒜愈伤组织诱导率的影响 　　由表1可知，不同浓度的NAA和6-BA配比对大蒜茎尖愈伤组织的诱导效果不同。当6-BA浓度为2.0~3.0 mg/L时，添加0.5 mg/L NAA的培养基比添加0.2 mg/L NAA的培养基更有利于大蒜愈伤组织的诱导。而且，当NAA浓度不变时，愈伤组织的诱导率随着6-BA浓度的增加呈先升后降的趋势，其中，以附加6-BA 3.0 mg/L和NAA 0.5 mg/L的MS培养基上的大蒜愈伤组织长势最好，为淡黄色，诱导率最高，达到76.7%，是试验中最适合诱导大蒜愈伤组织的培养基。 　　2.2 不同浓度6-BA和NAA对大蒜不定芽诱导的影响 　　从表2可以看出，各处理培养基内的愈伤组织均能分化出不定芽。当NAA浓度不变时，大蒜愈伤组织分化出的芽数随着6-BA浓度的增加呈先增后降的趋势，且低浓度的NAA（0.1 mg/L）对芽的诱导效果好于高浓度的NAA（0.5 mg/L）。表明6-BA与NAA间的浓度比值较大时，有利于芽的分化，而其比值较小时不定芽分化受到抑制。其中附加6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.1 mg/L的MS培养基的处理效果最好，其增殖倍数达5倍，不定芽苗的长势最好，且较节约成本。试验发现，6-BA浓度过高时会抑制不定芽的分化，个别处理出现玻璃苗，这与前人的研究结果一致[4]。 　　2.3 不同浓度NAA对大蒜不定芽苗生根的影响 　　由表3可知，在不添加NAA的MS培养基上，大蒜不定芽诱导出根的概率较低，且不定芽苗表现出根少、细弱、上部芽尖黄化等特征。而附加0.2~0.8 mg/L NAA的MS培养基对大蒜不定芽苗的生根有不同程