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PRAS40-读书报告2008.12.3
PRAS40的研究进展 报告人：李 新 导 师：陈临溪教授 南华大学药物药理研究所 lx820913@ 读书报告 PRAS40的研究进展主要内容 PRAS40的含义 PRAS40的发现 PRAS40的结构特征 PRAS40的细胞生物学功能 2003年斯坦福大学 Kovacina等人发现 了一种 Proline-rich-Akt Substate,40kDa.故命名为PRAS40 .该发现也被誉为2004年斯坦福大学学术研究的亮点之一. PRAS40作为Akt的作用底物和14-3-3的结合蛋白，它在细胞生长、凋亡、转化以及肿瘤发生等方面起重要作用。 PRAS40的含义 PRAS40的发现(1) 蛋白质相互作用实验方法 免疫共沉淀和亲和层析共分离 酵母双杂交系统 FAR WESTERN 表面等离子共振（SPR）法 免疫共沉淀和亲和层析共分离 免疫共沉淀是证明蛋白质-蛋白质相互作用的最直接最经典和最有效的方法，如蛋白A能与B相互作用结合成异源二聚体，无论用抗A或抗B的抗体或与A或B的亲和物偶联的agarose小珠都能把A和B沉淀下来。因此广泛用于蛋白质相互作用研究。 常用的小珠：GST-Agarose（不需要抗体） ProteinA-Agarose(用时需加抗体) 基本方法： 1.表达蛋白质A 2.蛋白质A与亲和小珠结合 3.用结合有蛋白质A的亲和小珠调取细胞破碎液中蛋白质B 4.离心、洗涤亲和小珠若干次 5.处理亲和小珠使蛋白质A、B解吸附（可以直接用SDS上样BUFFER 煮） PRAS40结构特征 PRAS40的细胞生物学功能 PRAS40与信号转导 PRAS40与细胞生长 PRAS40与细胞凋亡 PRAS40与肿瘤 PRAS40与细胞生长 PRAS40与细胞凋亡
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